方案摘要
方案下载| 应用领域 | 生物产业 |
| 检测样本 | 其他 |
| 检测项目 | |
| 参考标准 | 无 |
市面上有众多的新冠病毒qPCR检测试剂盒，本应用方案采用韩国Seegene公司的AllplexTM 2019-nCoV检测试剂盒在耶拿荧光定量PCR仪 qTOWER³G上进行样品检测，获得符合预期的结果。
使用不同荧光染料标记的探针可以同时检测冠状病毒特异性RNA和新冠病毒SARS-CoV-2特异性RNA，以及内质控基因。本方案中使用耶拿公司的InnuPure C16自动核酸提取仪与InnuPREP病毒DNA/RNA试剂盒进行样本核酸的提取纯化。10µl阳性对照(RP-VP K)作为样本，加入400µl PBS缓冲溶液， 洗脱体积为100µl。所有RT-qPCR扩增均在20μL反应体系中进行，并根据试剂盒说明书的指示制备PCR反应体系。从阳性样本拭子中提取RNA，并进行三种不同浓度的稀释，同时与NTC进行检测。
稀释后的阳性对照在新冠病毒靶基因E基因、N基因、RDRP基因以及内质控IC的相应检测通道中均检出有效Ct值。 阴性对照在四个检测通道中均表现为阴性。 故本次实验有效。
文献贡献者
CyBio FeliX完成自动体系构建并在qTower3上进行新冠病毒的qPCR检测
母牛原乳中乳腺炎病原体的qPCR检测
通过qPCR热漂移分析来检测蛋白熔解温度
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