方案摘要
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经济合作与发展组织的标准测试中使用的许多生态毒理学测试实验室在世界各地,鲤鱼(鲤)的物种的定量鲤鱼Vtg的ELISA试剂盒的开发。该套件也可用于对Vtg在黑头呆鱼(Pimephales promelas),另一种广泛使用的种鲤科测试样品的定量。用于分析血浆样品的测定法进行了优化,但也可以用于其他类型的样品(例如全身匀浆)。 该分析是基于利用之间的特异性结合的抗体和Vtg的上的夹心法。微量滴定板中,是预先涂有一个的Vtg的特定捕获抗体,其中结合Vtg的样品中加入到孔中。未绑定的洗涤组件,和一个不同的的Vtg的特定抗体(检测抗体)被添加,创建一个夹心抗体和Vtg的。洗涤未绑定的检测抗体,酶标记的二次抗体,被添加的夹心结合。最后一次洗涤后,酶的活性来确定通过添加这给出了一个有色产物的基板。酶的活性(颜色强度)是直接正比于样品中的浓度对Vtg,使用纯化从鲤鱼Vtg的标准进行校准测定。 该法是高度敏感和强大的。工作范围的Vtg的标准是正常:0.98-125的NG商品来源/毫升内和批间变异系数(CV)为5.6%和24%的工作范围之内。 鲤鱼Vtg的酶联免疫吸附测定试剂盒有两种尺寸,96孔和480孔(1和5板)。的试剂盒,包含预coatet微量滴定板,鲫鱼Vtg的标准,所需的运行检测的抗体和试剂,以及一个有启发性的协议。
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