分选型流式细胞仪的一个关键参数是延迟时间,细胞由激光检测点运动到偏振板所用时间为延迟时间。如上图所示,激光检测点可设置在流动室(石英杯激发),亦可设置在流动室外(空气激发),对应不同的延迟时间t1和t2。那么石英杯激发、空气中激发这两种激发方式有何区别呢?细胞在聚集后排成一列,在流动室中速度相对较慢,流出流动室区域后细胞会被加速。
石英杯激发的好处在于:激光在细胞流速相对较慢的流动室区域被激发,激光照射时间更长,可在低功率激光器条件下获得较高的检测灵敏度。同时,优于激光器功率降低了就不许再配套特殊的激光冷却系统了。缺点在于:细胞经历了流动室慢速区和流动室外加速区两个速度不同的区域,会给后续实验缺点延迟时间t带来一定困难。
相对的,空气中激发细胞运动速度恒定,延迟时间t较好设置。但是对于仪器配置要求较高,需要高功率激光器甚至专用激光器冷却系统。
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