和其他的技术领域一样,纯化师也有着属于他们自己的专属词汇。每一个词都以通俗易懂的方式来表述学术目含义。虽然相同的术语可能也应用于其他学科,但是他们的含义确是千差万别的。
今天,小G在此列出了纯化过程中必须了解的10个词语。如果你是个最近才开始接触纯化的小白,对这些术语还不够熟悉,那么这10个词语有助于你理解和看懂与纯化过程相关的内容。如果你是一个经验丰富的纯化老手,这些标准定义会在你指导他人显得格外顺手。
1. Chromatogram 色谱图
一张反应检测器响应值的图表。如图是一个典型的吸光度值(280nm)对时间(min)的色谱图。当一个响应被记录下来时,在色谱图上即会出现峰。
2. Resolution分辨率
这个分辨率可不是屏幕的分辨率哦。而是对封装好的色谱柱分离两种溶质(eg. 蛋白质)能力的评价术语。溶质用检测器来进行监测,比较常用的是UV值。分辨率越好,说明色谱柱对于这两种溶质的分离能力越强。
3. Column efficiency 柱效
指从装好的柱床中洗脱窄而对称峰的能力。是柱上发生谱峰加宽的重要影响因素,常常与色谱柱的理论塔板数(Theoretical plates, N)相关。相较于低理论塔板数的色谱柱而言,高理论塔板数的色谱柱更有利于在特定的保留时间内生成更窄的峰。
4. Seletivity选择性
指同一根色谱柱中两种溶质(eg. 蛋白质)的相关保持力(Retention)。选择性和两峰出现时间的距离相关。距离越宽,选择性越好。
5. Peak broadening谱峰加宽
指当一种溶质流经一个色谱柱或色谱纯化系统时扩散的区域。可致降低分辨率从而稀释溶质。这种现象也被称为带加宽(Band broadening)或区域加宽(Zone broadening)。对于此现象的扩展理论解释有很多因素组成,如在固定相与流动相中的纵向扩散(Longitudinal diffusion),涡流扩散(Eddy diffusion)以及传质阻力(Mass transport)。
6. Flow rate容积流速
流经色谱柱和/或色谱系统的容积流量,单位为毫升/分钟(mL/min)。
7. Flow velocity线性流速
流经色谱柱和/或色谱系统的线性流量,单位为厘米/小时(cm/h),公式为体积流速除以横截面积。在放大工艺上十分重要。
8. CV flow 柱体积流速
容积流速用柱体积来表达。单位为柱体积/小时(CV/h),在比例缩放上是个很有用的单位。
9. Delay Volume 延迟体积
指在样品分离收集的时候,延迟体积指在监测器和组分收集器间的系统组件与管路的体积。梯度延迟体积与溶液混合器和色谱柱两点间的容积相关。
10. Dead Volume 死体积
指从进样器至检测器之间除掉色谱柱体积的容积。这部分体积一般是无法改变的。
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