如上图,本文工作内容是弄清楚了磺胺类抗肿瘤药物indisulam的作用机制:通过把RBM39(RNA binding motif protein 39)召集到泛素连接酶E3,诱导RBM39泛素化从而下调胞内RBM39,引起RNA切割紊乱杀死癌细胞。
如何做的呢?如下图:文章作者利用CRISPR/Cas9技术在RBM39上fusion了GFP,这样就能通过流式简便、快速的实现对胞内RBM39水平进行监测。小分子药物indisulam是介导RBM39泛素化的桥梁,中间还需要其他蛋白的参与,文章作者再次巧妙的利用了CRISPR/Cas9技术去逐个“敲掉”可能参与这个过程的蛋白质之后用流式检测胞内RBM39水平,最终解析出上图中的DCAF15及DDB1参与了小分子药物indisulam介导的RBM39泛素化!
Han T, Goralski M, Gaskill N, et al. Anticancer sulfonamides target splicing by inducing RBM39 degradation via recruitment to DCAF15[J]. Science, 2017.
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