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大家好,我们又见面了。上二期内容,我们介绍了甘油三脂酰基位点对于营养学和消化吸收的重要意义,以及EIEIO技术使用酰基特征碎片对脂质酰基异构体的定量应用。EIEIO技术的简便性就在于无需优化色谱分离,且方法无需特殊设定,大大提高了分析效率。本期内容,我们将介绍EIEIO技术在脂质结构解析中的另一个主要应用,双键位点解析。
本期内容
结构决定功能,不饱和脂肪酸的双键位点不同,其生物学意义与功能都会有较大不同。2024年1月,协和郑昕团队和中国矿业大学(北京)铁偲团队在AC上发表文章1,使用EIEIO技术对磷脂酰胆碱(PCs)分子异构体进行鉴定。文中通过结构驱动保留时间预测算法与EIEIO技术在PCs酰基脂肪链双键位点鉴定能力相结合,在大鼠肺组织样本中共计鉴定出属于35种分子组成的130种PCs异构体,并对这些异构体进行定量,发现了在尘肺造模过程中,含相同酰基脂肪酸PCs分子分布的高度相关性。图1中的左图展示了文章中使用EIEIO酰基脂肪链双键位置中特征“V”型碎片分布的特点进行双键位点鉴定;关注右图可以发现,在大鼠尘肺组织样本中,PCs的sn-2酰基链为20:4的多不饱和脂肪酸含量显著性上调。结合EIEIO技术的脂质精准解析,更方便科学家从分子水平探索疾病生理变化。
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图1. (左) 使用酰基脂肪链双键位置中特征“V”型碎片分布特点进行双键位点鉴定;(右) 大鼠尘肺样品组和对照组热图,及大部分不饱和脂肪酸显著性上调1.
酰基脂肪链的双键位点,或双键氧化位点不光在生物功能上,具有重要意思;同时在食品营养上,也具有重要研究价值。2023年,检科院陈颖研究员团队发表文章2,通过CID(碰撞诱导解离)和EIEIO两种碎裂技术鉴定四种典型TG的非挥发性衍生物在油炸温度下的结构特征,提出了油炸过程中四种TG的可能氧化途径,为解释衍生物的毒性大小与结构相关性奠定了基础。文中指出,EIEIO较于传统CID碎裂模式,可以表征TG更深层次的结构, 如:sn-2位置的酰基脂肪链,及C=C双键位点。图2展示了EAD技术表征TG酰基脂肪链C=C双键位点及其烹饪氧化后的环氧化位点,利用EIEIO技术在C=C双键上特有的“V”型碎片离子分布特征,可以准确快速鉴定双键位点。
图2. 文献2中使用EIEIO对TG酰基脂肪链C=C双键位点及其烹饪氧化后的环氧化位点进行表征.
听了本期内容,相信您对EIEIO表征酰基脂肪链C=C双键位点的应用,有了一定的理解!到此,EIEIO技术表征脂质精细结构的内容就告一段落了。最后,我们来总结一下本期和前几期的内容:
1
当EAD的KE>=10eV时,进入EIEIO模式,可提供脂质精细结构表征所需的5方面信息,即头基信息,甘油骨架信息,酰基异构信息,双键位点信息和顺、反异构信息,对脂质结构进行深度表征;
2
从应用需求出发,EIEIO技术在解决脂质酰基异构体的定性定量、酰基脂肪链C=C双键位点表征上,具有很大应用空间;
3
从使用性能出发,EIEIO技术无需复杂的前处理过程,或是复杂采集过程,操作简单高效。
本系列“庖丁解牛,看EAD解析脂质精细结构”,到这里就结束了。下期内容,我们将介绍EAD技术在生物药结构表征上的应用,欢迎大家的关注。
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