Molecular Devices 报名网络讲堂,了解如何使用自动化高通量平台进行蛋白表达体系中的优化及筛选

日期:2016年9月22日

时间:10:00-11:00

主讲人:邓玮博士 

国家蛋白质科学中心·上海  规模化蛋白质制备系统运维主任


 

  • 1999-2003年  武汉大学化学与分子科学学院 本科

  • 2003-2008年  中科院上海有机化学研究所 生命有机化学博士,从事天然产物生物合成研究

  • 2008-2012年  美国密西根大学生化系雷鸣教授课题组从事dna损伤修复途径中重要复合物soss的功能及结构研究,成功解析了多个重要复合物结构并进行相关功能研究获得重要发现。

  • 2012年-至今   国家蛋白质科学中心,担任规模化蛋白质制备系统主任,从事自动化高通量生物科学实验研究工作,参与设计了多套自动化生物科研系统,并进行相关科研应用开发。

 


在酶的定向进化 、组合合成生物学、微生物表面展示技术及高通量克隆构建等技术领域中,如何能做到高通量快速挑选克隆以提高工作效率?qpix微生物自动化高通量筛选平台可帮助实现省时省力。


本讲座将介绍其在蛋白质科学方面一种新的应用----高通量快速筛选蛋白质的可溶性表达条件,为进一步的生物化学、结构学研究打下基础。

工作流程:
1、运用c端融合表达二氢叶酸还原酶(dhfr)的载体系统高通量的筛选具有正确读码框的随机pcr克隆质粒
2、运用分段式的gfp荧光活性筛选系统快速分选出细胞内有目标蛋白可溶性表达的克隆
3、运用体外荧光筛选技术区分出可溶性蛋白表达量的高低。





图1 运用qpix进行高通量蛋白可溶性筛选整体流程示意图


图2 结合cloneselect imager观察荧光强弱
运用这种方法可以快速高通量判断蛋白可溶性的强弱


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