affinite SPR仪器在蛋白-肝素相互作用分析中的应用

普瑞麦迪(北京)实验室技术有限公司

在分子生物学和生物化学研究中，理解生物分子之间的动态相互作用对于揭示其功能与机理至关重要。表面等离子体共振（SPR）技术因其实时动态无标记监测分子互作，已经成为研究这些相互作用的关键工具。Affinité 公司是一家专业的SPR仪研发生产企业，提供多种型号SPR仪器，可满足实验室及现场分析需求。

Affinité SPR仪——P4PRO

利物浦大学和基尔大学的研究团队在最新发表的研究中，基于Affinité 的标准金膜涂层芯片，开发了一种新的传感器表面修饰方法，并成功应用于Affinité SPR仪，检测肝素小分子与蛋白间相互作用。这样的传感器表面可以批量制备、保存，进一步拓展了Affinité SPR仪器的应用。

关键词

肝素，表面等离子体共振，蛋白质-多糖相互作用，酶竞争性抑制，生物素化肝素捕获

图1 OEG 自组装单层以及随后捕获链霉亲和素和生物素化配体的示意图

材料与方法

生物素化肝素的制备

研究团队使用羟胺生物素对猪肠肝素进行了还原端生物素化，这一过程确保了产物的稳定性。37°C下反应48小时，去除未反应的生物素并更换缓冲液。

传感器表面修饰与功能化

在传感器金膜表面修饰硫醇油基乙二醇/生物素硫醇油基乙二醇单分子层，孵育链霉亲和素，再通过链霉亲和素捕获还原端生物素化的肝素。这种方法确保了传感器表面的高稳定性和低非特异性结合。

图 2 在biotin-OEG/OEG 自组装单层膜上捕获链霉亲和素、固定还原端生物素化的肝素

研究亮点

高效检测肝素结合蛋白

研究团队通过Affinité SPR仪器成功检测了成纤维细胞生长因子2（FGF2）与肝素的结合。这一实验验证了新型传感器表面的有效性和稳定性。

图 3 FGF2 和 GST-HS3ST3A1 与肝素衍生物的结合

图 4 可溶性肝素诱导的解离

酶竞争性抑制研究

研究展示了对肝素硫酸磺基转移酶（HS3ST3A1）竞争性的分析，发现选择性修饰的肝素衍生物和苏拉明能够有效竞争酶的糖受体位点。这一发现有助于深入了解酶对多糖中硫酸化结构的选择性。

图 5 肝素衍生物竞争 HS3STA1 与肝素的结合

图 6 苏拉明竞争 GST-HS3ST3A1 与肝素的结合

多功能传感器

该传感器表面不仅可以用于肝素，还可以应用于研究其他类似的多糖，这为研究许多内源性蛋白质和病毒与宿主细胞相互作用提供了新工具。

研究意义

这种生物素功能化表面在生物医药研究中有广泛的应用潜力，特别是在研究蛋白质-多糖相互作用、酶抑制剂筛选以及病毒与宿主细胞相互作用方面。Affinité SPR仪器的应用使得现场分析更加便捷，为未来的生物医学研究提供了更多可能性。

Affinité P4PRO分子互作仪

加拿大Affinité Instruments是一家专注于分子互作研究的公司，基于无标记、高灵敏、表面等离子共振技术（SRP技术）开发了性价比极高的个人型分子互作仪，旨在让每位科研工作者和实验室都能够顺利的把分子互作相关实验开展起来，助力生物科学发展。

P4PRO是Affinité Instruments最畅销的一款分子互作仪，其特点是

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