细胞前处理

上海酶联实业有限公司

2016/08/16 09:20

根据收集细胞数量，培养细胞的前处理：将培养细胞消化，1000～1500转/分钟离心10分钟，弃上清，留下层细胞，每管加0.3～0.5ml生理盐水或匀浆介质制备成106/cm3细胞悬液，即106/ml，再进行破碎。

破碎细胞的方法有三种：①、用匀浆器匀浆。②、用超声粉碎器粉碎。③、反复冻溶3次（第③种方法有时会影响酶活力）。制备好的细胞悬液一般不需要离心。细胞数量较大可以适当加大匀浆介质量。裂解液考虑到成分可能干扰反应，所以不推荐使用，或者使用相对温和的裂解液Triton X-100.建议最好采用物理方法破碎细胞

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