细胞计数法

2013-11-07 20:34  下载量:10

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实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 具体操作: 1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。 2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算: 细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104 说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。 公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为: 1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 (注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液) 细胞密度=(4个大正方格细胞总数/4)×稀释倍数×104个/ml 注:稀释倍数(至少乘以2,因与trypanblue等体积混合)

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