生物实验报告有关细胞计数法的怎么写?

2013-11-07 20:39  下载量:7

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1、 制备细胞悬液 对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物制备成细胞悬液。 1)、终止培养,将培养液吸出,用PBS洗培养物一次。 2)、 给培养瓶内加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,于37℃消化1-3min 。期间在镜下观察。当细胞变圆接近脱壁时,弃消化液。 3)、加入一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使细胞脱壁而制成细胞悬液。 2、计数与计算过程 1)、在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。 2)、用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹糟处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。 3)、置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者,对于细胞团按单个细胞计数。 4)、按下式计数细胞悬液的密度: 细胞密度=(4个大正方格细胞总数/4)×稀释倍数×104个/ml 注:稀释倍数(至少乘以2,因与trypanblue等体积混合)

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