凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的。
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。
凯氏定氮仪 产品应用及优点:
DRK-K616全自动凯氏定氮仪是根据凯氏定氮法进行氮含量测定的自动智能化分析仪。它可广泛应用于食品加工、饲料生产、烟草、畜牧、土肥、环境监测、医药、农业、科研、教学、质量监督等领域做常量、半微量样品氮与蛋白质的分析,还可用于铵盐、挥发性脂肪酸/碱等的检测。用凯氏定氮法测定试样时,需经过 消化、蒸馏、滴定 三个过程。蒸馏和滴定是DRK-K616型凯氏定氮仪的主要测定过程。
DRK-K616型凯氏定氮仪是根据经典凯氏定氮法设计的全自动蒸馏,滴定测氮系统;该仪器给实验室测定人员在进行测定氮—蛋白质过程中,提供了极大的方便,且具有使用安全,可靠;操作简单,省时等特点。中文对话界面使用户操作方便,界面友好,显示的信息丰富,使用户能够快速掌握仪器的使用。
根据凯氏定氮原理测定,需要三个步骤,即消化、蒸馏、滴定。
凯氏定氮 工作原理——消化
将含氮的有机化合物(蛋白质)与浓硫酸和催化剂(硫酸铜或凯氏消化片)一同加热,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨(NH3)并与硫酸结合形成硫酸铵。(铵 NH4+)
消化过程:
微火加热煮沸,烧瓶内物质炭化变黑,产生大量泡沫,泡沫消失后加大火力保持微沸状态,至液体成蓝绿色澄清状态后继续加热 05-1h,结束后冷却。
(可使用自动消解仪完成前处理工作)
凯氏定氮 工作原理——蒸馏
得到的溶液经稀释定容后加入NaOH,蒸馏释放出NH3,冷凝之后收集于硼酸溶液中。
蒸馏过程:
先将消化好的样品进行稀释,加入NaOH,经过加热后产生的氨气进入冷凝管,经过冷凝之后流入装有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸铵。
(硼酸溶液中加有混合指示剂,形成硼酸铵之后吸收液由酸性变为碱性,颜色由紫红转变为蓝绿色。)
凯氏定氮 工作原理——滴定
用已知浓度的盐酸标准溶液进行滴定,根据盐酸消耗的量来计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,即得到蛋白质的含量。
(滴定是指一种定量分析的手段,也是一种化学实验操作。它通过两种溶液的定量反应来确定某种溶质的含量,是根据指示剂的颜色变化指示滴定终点,然后目测标准溶液消耗体积,计算分析结果)
滴定过程:
用盐酸标准溶液滴入硼酸铵溶液中,使溶液的颜色由蓝绿色变为浅红色。
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