副结核病(M.pt)ELISA试剂盒说明

2016-08-24 14:09  下载量:1

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牛副结核病(M.pt)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 96T 使用目的: 本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中副结核病(M.pt)表达。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛副结核病(M.pt)表达。用纯化的牛副结核病(M.pt) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中副结核病(M.pt)相结合,经洗涤除去未结合 的抗原和其他成分后再与HRP 标记的副结核病(M.pt)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体 复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸 的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中牛副结核病(M.pt)的存在与否。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶 2 酶标试剂6ml×1 瓶8 阳性对照0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板12 孔×8 条9 阴性对照0.5ml×1 瓶 4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份 5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张 6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1 孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不

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