光合细菌培养基

2016/01/18   下载量: 4

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应用领域 生物产业
检测样本 生物产业
检测项目
参考标准 光合细菌培养基

分子量: 406.38 分子结构: 外观: 白色粉末 规格: 20 mg/支 纯度: ≥ 98% 用途: 用于含量测定/鉴定/药理实验等。 提取来源: 唇形科筋骨草属植物筋骨草Ajuga decumbens Thunb.的全草 溶解性: 可溶于水、甲醇、乙醇、DMSO等溶剂。 药理药效: 清热解毒、止咳祛痰、养筋和血 贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光 有效期: 2年 产品中文名称: 巴西苏木素

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光合细菌培养基

 红螺菌培养基:    

1、富集培养基:     

    经典的紫色非硫细菌(红螺菌)的富集培养基的配方为:NH4Cl:0.1g; NaHCO3:0.1g;K2HPO4:0.02g;CH3COONa:0.1~0.5g;MgSO4·7H2O:0.02g; NaCl:0.05~0.2g; 生长因子1ml,蒸馏水97ml,微量元素溶液1ml,pH为7.0。     

    其中,①5%NaHCO3水溶液,过滤除菌取2m1加入无菌培养基中。②生长因子:维生素B10.001mg、乙尼克丁酸0.1mg、对氨基苯甲酸0.1mg、生物素0.001mg,以上药品溶于蒸馏水中,定容至10ml,然后过滤除菌。③微量元素溶液:FeCl3·6H2O :5mg;CuS04·5H2O:0.05mg;H3BO4lmg;MnCl2·4H2O:0.05mg;ZnSO4·7H2O:1mg;Co(NO3)2·6H2O: 0.5mg。以上药品分别溶于蒸馏水中,并定容至1000m1。    

    除①、②、③外,各成分溶解后100 Pa灭菌20min。然后分别加入①、②、③,如加入0.1%~0.3%的蛋白胨则能促进该菌生长。    

2、分离培养基:     

    传统的红螺科分离培养基的配方为:NH4Cl:0.1g; MgCl2:0.02g; 酵母膏:0.01g; K2HPO4:0.05g; NaCl: 0.2g; 琼脂2g,蒸馏水90ml。100Pa灭菌20min。     

    灭菌后,无菌操作加入经过滤除菌的0.5g/5mlNaHCO3,再无菌加入过滤除菌的0.1g或0.1mlNa2S·9H2O(降低培养基的氧化还原值),最后再加入5ml经过滤除菌的乙醇、戊醇或4%丙氨酸。用过滤灭菌的0.1mol/H3PO3调pH至7.0。   

摘自百度知道。    

    筛选富集培养基为: NH4Cl 1g/L, NaHCO3 1g/L, CH3COONa 3g/L, KH2PO4 0.3g/L, MgSO4 0.1g/L, 酵母膏0.5g/L, 微量元素母液1g, 自然pH值。扩大培养培养基以海水代替微量元素母液。1000~4000lx光照, (30±2)℃恒温培养。  

基础培养基:NH4Cl:1g; Na2HPO4: 0.5g; MgSO4: 0.2g; NaCl: 2g; NaHCO3: 5g; 酵母膏:2g  乙醇2ml,用 0.1N H3PO4调至pH7.0。  

划线培养基:采用固体琼脂培养基,即在基础培养基的基础上添加1.0%的琼脂。 

以上培养基初始pH值均用H3PO4调至7.0,经121℃灭菌30分钟,NaHCO3过滤除 菌后加入。培养条件:光照培养箱温度控制在30℃、光照强度控制在 3000uE.m-2s-1培养。 

光合细菌是一种兼性嫌气细菌,需要深层培养或在真空干燥器内达到嫌气或半嫌气状态,一般将混合菌放入培养液中先富集再分离。具体方法:将混合菌装入 10ml试管中,加入培养液充满至刻度,盖上胶塞,在光照条件下保持在30℃左右培养。待培养液出现红色后,取培养液加1.5%的琼脂,制成固体培养基,取菌液分别用无菌水以10-100000000倍稀释,分别取lml样本涂在平皿上,光照、30℃培养2d左右在平板上长出菌落。移至平板采用划线法进行分离,将划好线的平板倒置,在相同条件下培养,反复分离纯化,挑取不同特征的菌落,用斜面保存,纯化分离后的菌种置于冰箱保存备用。     

 PSB 培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外,还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素,将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基,基本配方为:CaCl2 0.3g,MgSO4·7H2O 0.5g,酵母膏3g,蛋白胨3g,蒸馏水1000ml,pH: 6.8. 如需制固体培养基再加2%琼脂。培养温度:25℃~30℃最佳,光照强度:2000LX~5000LX,PH:7.5~8.5最佳。   

把菌种接种到灭好菌的培养基中,在三角瓶中进行二级培养,每天摇晃几次。把 40L 的反应器中加满自来水,放入通气管,盖上保鲜膜一起用次氯酸杀菌消毒24小时,用硫代硫酸钠(1L次氯酸需要150g硫代硫酸钠)来中和。以15%的接种量接入反应器中,用泵通气培养,用分光光度计跟踪测量菌液的密度,得到菌液的密度较高,而且反应器还可以进一步放大。


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