资料摘要
资料下载假定你抽提 rna 时使用到的有机试剂 - 氯仿、异丙醇、无水乙醇 - 都是国产的 (这是完全可以使用的)。我的问题是:你采取了什么措施来降低或者杜绝 RNase 的污染?具体地: 你是如何选择、预处理、使用和保存氯仿和异丙醇? 你是如何配制和保存 75% 乙醇? 坦率地讲,因为有机试剂的问题导致抽提失败,我真没有听到;或许有的问题是由有机试剂导致,但使用人也多是不会怀疑到这一点的。恐怖分子的行为倒是听到过:对氯仿、75% 乙醇进行高压灭菌处理。令我无言的是,这样的恐怖行为既没有导致恐怖的后果,也没有影响实验的成功。 不过我还是想提供一些建议。我关注的是质量控制,而不是单单是简单或者方便。 RNA 抽提中涉及的有机试剂,包括苯酚、氯仿、异丙醇、乙醇。苯酚多为商品化的东西了,选择和保存都不应该有什么问题;只强调一点:尽管 Tris 饱和的苯酚也可以用于 RNA 的抽提,但使用水饱和苯酚会更好一些,因为 RNA 在 pH 7 以上的溶液中,发生降解的机率大大提高。下面是关于氯仿、异丙醇、乙醇的有关建议。 选择 国内大的化学试剂公司生产或者监制的分析纯级别试剂就完全可以满足要求。 预处理 不需要进行任何的预处理。绝对不可以高温高压灭菌:这不是该不该的问题,而是能与不能的问题。这三个试剂的沸点都低于 100C,高温高压可能导致危险。 75% 乙醇的配制 一份无菌无酶的水与 3 份 (体积)无水乙醇混匀即成。不要使用量筒等过渡容器,使用天平来秤量:水的比重为 1,无水乙醇的比重按 0.785 计算。是先将无水乙醇倒出部分后再加入水,还是往装水的瓶子中加入无水乙醇,没有什么区别。事实上,70% - 80% 的乙醇都具有较好的洗涤能力,同时也不会导致片段比较大的核酸的丢失,所以,配制时就不要为了准确而左勾右兑的。关于现用现配,从质量控制角度看,不是一个好的办法;这也是你永远发现不了75% 可能会有问题的基础。75% 乙醇也不可以高温高压灭菌,原因同无水乙醇。 保存 首先,要使用新的试剂;试剂架上别人使用过并写有标记的,一定要找当事人确定,以防已被用于其它用途而标记未改。其次,分成相对小一点的包装 (50ml – 100ml);500ml 的瓶子取液是非常不方便的,移液器的杆子往往都进入了瓶口里,非常容易造成污染。第三,塑料瓶子密闭性好,装醇类试剂是非常好的选择;但氯仿绝对不要使用塑料瓶子。第四,盖紧瓶盖,作好标记,再在瓶子上盖上一个透明塑料袋防尘。第五,保存于室温。 将有机试剂保存于冰箱的人不在少数,但这么做却是令人奇怪的。首先,任何挥发性的东西都不保存在冰箱 (除非万不得已,如 DEPC),这应该成为一个良好的习惯。其次,与外面相比,冰箱除了灰尘少一点外,什么都会比外面多的。第三,在室温打开低温的瓶子,将导致空气大量进入瓶子,增加了污染的风险。 使用 非常幸运的是,有机试剂对菌污染和酶污染似乎有我们想象不到的抑制和灭活作用,所以,使用这些试剂没有特殊的要求,按正常抽提 RNA 的要求就完全可以了。吸取有机试剂时,最好使用比要吸取的体积大的移液器,因为有机试剂有越吸越多的现象,试剂容易接触到移液器的杆头 – 污染不说,氯仿会腐蚀杆头的。75% 乙醇使用一次性的吸管移取,一次可以吸数 ml,既快又方便。如果舍不得丢弃,用完后放入塑料自封袋中保存,是非常安全的。
葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶一过氧化物酶法)
简介:英文名称:PLP;Pyridoxal-5-phosphatemonohydrate;Pyridoxal-5-monophosphoricacidester;3-Hydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-methylisonicotinaldehyde5-phosphate;Codecarboxylase 其他名称:5-磷酸吡哆醛;吡多醛5-单磷酸酯;3-羟基-2-甲基-5-[(膦酰氧基)甲基]-4-吡啶甲醛一水合物;磷酸吡醛素;吡哆醛-5-磷酸酯;3-羟基-5-羟甲基-2-甲基异烟酰;辅脱羧酶 CAS号:41468-25-1 C8H10NO6P?H2O=265.15 级别:AR 含量:≥99.0% 维生素B6:≤0.5% 干燥失重:≤10.0% 重金属:≤20ppm PH(0.25%agSolution):2.6~3.0 性状(以下信息仅供参考):类白色至淡黄色或黄色粉末。熔点140~143℃。几乎无气味。无味。见光缓慢分解。易溶于甲酸、含水吡啶和稀碱液,微溶于水、乙醇、丙酮、乙醚、氯仿和苯。水溶液在冷而避光处很稳定,0℃时3周
微生物检测冻干粉质控菌种说明书
简介:阿尔茨海默病(AD)是一种全球范围内患病人口较多的神经退行性疾病。 自发病起,患者的认知功能会逐渐衰退,病理表现为大脑中β淀粉样蛋白(Aβ)的累积、过度磷酸化的tau蛋白导致的神经纤维缠结以及神经炎症。 cGAS-STING通路是哺乳动物细胞检测外源DNA,并激活先天免疫反应的重要通路。它在缺血性脑损伤、帕金森病、亨廷顿病、脊髓侧索硬化症等神经疾病的发生发展中有重要作用,但是,cGAS-STING通路是否参与AD仍不清楚。 近日,由中国科学院昆明动物研究所的曾健雄和美国南加州大学的赵振领衔的研究团队,在国际顶尖杂志《自然·衰老》发表关于cGAS-STING通路参与AD的最新研究成果[1]。 他们发现在人类AD患者和衰老小鼠大脑中,cGAS与细胞质中的双链DNA结合,激活cGAS-STING通路,而敲除Cgas可以抑制AD模式小鼠的Aβ累积、神经炎症以及认知衰退。 他们还发现,STING抑制剂H-151可以显著抑制AD模式小鼠大脑中cGAS-STING通路的激活,抑制AD病理进程。 总的来说,这项研究揭示了先天免疫通路cGAS-STING和AD之间的重要联系,靶向
雌二醇 特价促销 350/25g
简介:英文名称:Estradiol;1,3,5-Estratriene-3,17beta-diol;17beta-Estradiol;3,17beta-Dihydroxy-1,3,5(10)-estratriene;Dihydrofolliculin 其他名称:β-雌二醇;雌甾二醇;雌甾-1,3,5-(10)-三烯-3β,17β-二醇;β-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二醇;3,17β-二羟基-1,3,5(10)-雌甾三烯-3,17β-二醇;β-雌激素 CAS号:50-28-2 C18H24O2=272.38 含量:≥98.0% 熔点:173~179℃ 比旋光度:+76~+83°(C=2,5mol/LHCl) 水分:≤3.5%(KARLFISCHER) 性状(以下信息仅供参考):白色或乳白结晶性粉末;无臭。本品在二氧六环、丙酮中溶解,在乙醇中略溶,在水中不溶。比旋度取本品,精密称定,加二氧六环溶解并定量稀释制成每1ml中含10mg的溶液,依法测定。 用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。 保存:2~8°C
红豆杉染色体水平基因组测序完成
简介:紫杉醇是目前已发现的最优秀的天然抗癌药物。紫杉醇生物合成途径已研究多年,而超大的基因组和复杂的代谢路线是途径解析的主要限制因素。中国科学院天津工业生物技术研究所与西北工业大学、深圳华大生命科学研究院等合作,首次完成了喜马拉雅红豆杉超10Gb的染色体水平的全基因组测序,并通过复杂基因组组装与分析,解析了红豆杉中生物合成紫杉醇的关键基因簇,探索了紫杉醇合成途径的起源与进化机制,为完全解析紫杉醇生物合成途径奠定了重要基础。 全基因组倍增事件是开花植物提升环境适应能力,并逐渐替代裸子植物,遍布地球的主要原因。通过对裸子植物喜马拉雅红豆杉基因组的进化分析,研究发现在地球上存活更久的红豆杉却几乎没有经历过明显的全基因组倍增事件,而是发生了大量的基因串联重复事件,其比例超过了几乎所有已知的开花植物。大量基因串联重复导致红豆杉中的一些基因家族急剧扩张,随着这些家族重复基因的功能分化,红豆杉进化出非常复杂的代谢物合成和转录调控网络。例如,与紫杉醇合成密切相关的细胞色素P450酶家族与酰基转移酶家族,通过串联复制都产生了超过50份基因拷贝,如此多的重复基因为红豆杉进化出极其复杂的紫杉醇合成途径提供了遗传基础。迄今为止,已在紫杉科的植物中发现了超过500种具有紫杉烷类天然产物。因此,大量的基因串联重复是红豆杉中紫杉醇合成途径形成的主要进化机制,也可能是红豆杉能在地球上存活至今的重要原因之一
革兰氏染色液 4X10ml 促销 30/盒
简介:.涂片经火焰固定,加(结晶紫溶液)溶液A染1分钟,用清水冲去染液。 2.加(碘液)溶液B染1分钟,水洗。 3.加(95%乙醇)溶液C,不时摇动玻片约10-30秒,至无紫色脱落为止,水洗。 4.加(沙黄复染液)溶液D,染1分钟,水洗。 5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。
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