TB1 Chemically Competent Cell 感受态细胞产品说明书

2014-02-06 10:38  下载量:1

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TB1 Chemically Competent Cell 产品说明书 产品规格 TB1: 10×100μl pUC19(control vector):10pg/μl 10μl 保存条件:-80℃ 基因型 F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (Strr)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR 产品说明 TB1感受态细胞来源于JM 83,是JM 83 hsdR型,缺少 BL21 (DE3)菌株的 T7 RNA polymerase,适合NEB公司的pMAL 系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E. coli RNA polymerase),经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。 操作方法 1. 取100μl冰上融化的TB1感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。 4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。 5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。 注意事项 1. 感受态细胞最好在冰上融化。 2. 混入质粒时应轻柔操作。 3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

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