NKAP 人NF-κ-B-激活蛋白(NKAP)ELISA Kit|96T|NKAP-北京方程生物科技有限公司

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NKAP 人NF-κ-B-激活蛋白(NKAP)ELISA Kit

NFκB, a pleiotropic transcription factor, is present in almost all cell types and is involved in many biological processes including inflammation, immunity, differentiation, cell growth, tumorigenesis and apoptosis. NFκB is a homo- or heterodimeric complex formed by the Rel-like domain-containing proteins RELA/p65, RELB, NFκB1/p105, NFκB1/p50, REL and NFκB2/p52. This complex is controlled by various mechanisms of post-translational modification and subcellular compartmentalization as well as by interactions with other cofactors or corepressors. NKAP (NF-κ-B-activating protein) is a 415 amino acid nuclear protein that regulates TNF and IL1-induced NFκB activation. As component of a DNA-binding complex, NKAP also functions as a transcriptional repressor that acts on NOTCH target genes. Loss of NKAP blocks the development of αβT- cells, suggesting that it is required for their maturation through repression of NOTCH genes.

NKAP 人NF-κ-B-激活蛋白(NKAP)ELISA Kit

操作步骤

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果判断与分析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

供货周期：	现货
品牌：	方程生物
规格：	96T
货号：	NKAP
CAS号：