相关背景:
三维细胞球(3D多细胞聚集球体),有别于常规培养的二维细胞,包含有充分接触培养环境的球面细胞和相对封闭的球内细胞。该特殊的细胞球体被广泛认为更有效地模拟活体的实质行为,提供更多预测性的观察结果。因此,三维细胞球的形成、生长、形态,以及加药刺激后等一系列复杂的变化过程,需要在培养箱内实现无标记、无干扰的长时间动态监测。
会议主题:
在这个讲座中,德国雷根斯堡大学(Universität Regensburg)Dr. Simone Bäumler博士给大家介绍如何使用innoME的zenCELL owl活细胞动态成像及分析系统进行三维细胞球的长时间动态监测。
Dr.Simone Bäumler 拥有丰富的三维细胞球培养和相关实验操作的经验。
讲座精华部分:
1. zenCELL owl对 U373人胶质瘤细胞形成肿瘤球的动态监测
U373细胞接种于琼脂糖包备的非粘附24孔板内,培养箱内震荡培养形成肿瘤球。
2. zenCELL owl对 MCF-7人乳腺癌肿瘤球增殖过程的动态监测
MCF-7肿瘤球接种于琼脂糖包备的非粘附24孔板内,培养箱内观察;在增殖过程中,肿瘤球变得更加圆润,其直径随着监测时间逐渐增加。
3. zenCELL owl对 MCF-7人乳腺癌肿瘤球贴壁生长过程的动态监测
MCF-7肿瘤球接种于无包备、仅组织培养物处理的24孔板内,培养箱内观察;在贴壁生长过程中,肿瘤球外缘部分细胞,接触组织培养物特殊处理的板底,开始粘附和贴壁。
然后,在接种肿瘤球后的12小时内,肿瘤球开始变的扁平,更多的细胞从肿瘤球球体初始区域向外移动。而这一过程,从最初的肿瘤球体单一方向向外移动,逐步拓展到球体的各个方向,最终以球体为中心向外围移动。
监测48小时后,贴壁的肿瘤球形成一个复合体,由中心的半球形多细胞肿瘤球和外围的单细胞层组成。
4. zenCELL owl对 MCF-7人乳腺癌肿瘤球经过透化处理后的动态监测
MCF-7肿瘤球接种于无包备的粘附24孔板内2天,形成肿瘤球复合体。继而吸出原始培养液,加入透化试剂-0.03%皂角苷溶液,培养箱内观察。
透化处理后的7小时内(视频中部分),肿瘤球复合体开始裂解和消散。
5. zenCELL owl对 U373人胶质瘤肿瘤球经过高渗处理后的动态监测
U373人胶质瘤肿瘤球接种于无包备的粘附24孔板内2天,形成肿瘤球复合体。继而吸出原始培养液,加入约500 mOsmol/kg的高渗溶液,培养箱内观察。
高渗处理后的4小时内(视频中部分),肿瘤球复合体开始皱缩变小。
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