通过疫苗接种获取免疫力,仍然是目前预防传染力强、危害严重疾病的有效方式,然而使用传统方法确定疫苗的抗原靶点耗时耗力。蛋白质芯片是一种有效的替代方法,并且在通量上也具有显著的优势,不仅可以使研究人员简化实验筛选方案,而且可以加快抗原疫苗靶点的发现。
来自牛津大学的Faith Osier教授,在TED2018年11月演讲中“The key to a better malaria vaccine”,讲述了Arrayjet芯片点样仪是如何帮助她的团队分析了来自7个非洲国家,15个地区,10000个人类血清样本,来识别针免疫抗体是通过什么方式来对抗疟疾寄生虫。同年12月,在Frontiers in Immunology发表如下文章。
恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)是疟疾的主要病原体,其致病手段是通过裂殖子入侵宿主红细胞,并在红细胞内大量繁殖,而此过程中表达的虫体蛋白和分泌的代谢产物成为关键的致病因子.因此恶性疟原虫的裂殖子蛋白可作为研发新型抗疟疫苗的重要靶标.
Faith Osier教授的研究团队利用收集的10000个人类血清样本, 筛选、合成了128种疟原虫重组裂殖子蛋白,使用ArrayJet Ultra Marathon 进行高通量点样,每张玻片8064个点,即文章中命名为KILchip芯片,如图1。
图1:采用ArrayJet高通量点样仪在硝化纤维素(NC)载玻片上进行蛋白点样,玻片分为21个相同的矩阵区域,每个矩阵384个点(3 repeats),重组疟原虫蛋白111 samples,17 control samples,8064个点/片,点样体积400pl,蛋白样品浓度(250μg/ml),点样温度18℃,湿度50%。
随后该研究团队,将高密度芯片KILchip 分别和肯尼亚疟疾病患66个血清样本、瑞典健康人的血清样本,以及抗体进行孵育杂交(如图2),其结果采用荧光芯片扫描仪进行荧光检测(如图3)。
图2:蛋白芯片放在抗原抗体反应容器中进行人血清和抗体孵育(donkey anti-human IgG-Alexafluor 647 ,室温孵育3小时)
图3左图:蛋白芯片杂交后荧光芯片扫描仪的结果分析,筛选出IgG抗体高度结合的裂殖子相关蛋白(左图:肯尼亚疟疾病患66个血清样本, 右图:瑞典健康人的血清右图)
通过对荧光强度的变化、数据对比和分析,快速、高效地筛选到同疟疾相关的疟原虫重组蛋白,并得到经典方法ELSA的验证,为研发抗疟疫苗提供新的靶点。
客户评价
“英国ArrayJet公司不仅生产非常出色的芯片点样仪,而且还拥有优秀的专业技术团队,可根据客户独特的项目需求定制解决方案。高通量和快速的点样方式吸引我们与Arrayjet进行合作。 在微阵列芯片设计的每一步,他们提供专业的应用服务,回答我们提出的相关问题。正是在这种出色的支持下,我们研究团队携同Arrayjet的芯片点样仪,完成了诸多相关科学研究。”
—Dr James Tuju, Principal Investigator, KEMRI Wellcome Trust, Kenya
原文文章
G. Kamuyu, J. Tuju, R. Kimathi, K. Mwai, J. Mburu, N. Kibinge, M. Chong Kwan, S. Hawkings, R. Yaa, E. Chepsat, J. M. Njunge, T. Chege, F. Guleid, M. Rosenkranz, C. K. Kariuki, R. Frank, S. M. Kinyanjui, L. M. Murungi, P. Bejon, A. F?rnert, K. K. A. Tetteh, J. G. Beeson, D. J. Conway, K. Marsh, J. C. Rayner and F. H. A. Osier
Frontiers in Immunology
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