百日咳疫苗免疫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

百日咳疫苗免疫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书
【预期用途】通过检测人血清或血浆样本中是否含有百日咳疫苗免疫抗体。
【检验原理】本试剂盒采用单克隆抗体包被微孔条，辣根过氧化物酶（HRP）标记基因工程重组表达的特异性抗原为示踪物，TMB显色系统，EIA捕获一步法检测人血清或血浆中百日咳疫苗免疫抗体。
百日咳疫苗免疫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）【贮存条件及有效期】试剂盒可置2－8℃存放12个月。
【样本要求】血清标本按常规方法由静脉采集。血浆标本可采用常规用量的肝素或枸橼酸钠抗凝。5天内测定的标本可放置4℃保存。标本放置在－20℃至少可保存3个月。标本避免溶血或反复冻溶。混浊或有沉淀的标本应离心或过滤澄清后再检测。需保存的血清在采集、保存过程中应注意无菌操作。
百日咳疫苗免疫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）【检验方法】
1.平衡：将试剂盒从冷藏环境中取出，置室温平衡30分钟后使用。
2.配液：将浓缩洗液用蒸馏水或去离子水20倍稀释备用。
3.设定：每次试验应预设空白对照1孔（暂不加任何液体），阴性对照3孔，阳性对照2孔。 4.加样：按顺序在各反应孔中分别加入20μl待检标本和阴、阳性对照。
5.加酶：依次向每孔加入100μl酶结合物（空白对照孔不加），振荡混匀。
6.温育：在反应板上加盖封板膜，置37℃温箱或水浴锅中，反应60分钟。
7.洗板：将孔内液体甩干，在各反应孔加入稀释后的洗涤液300μl，静置15秒钟，甩弃洗涤液；如此洗涤5遍，最后一次扣干反应板。
8.显色：每孔依次加入底物A、B液各50μl（包括空白对照孔），加盖封板膜，振荡混匀， 37℃避光显色15分钟。
9.终止：每孔加入终止液各50μl（包括空白对照孔），振荡混匀终止反应。
10.测定：用空白对照孔调零，并尽快用酶标仪单波长450nm测定各孔OD值。也可用双波长450nm/630-690nm测定各孔OD值。
【参考值】临界值=0.10＋阴性对照OD平均值 (阴性对照OD平均值≤0.05按0.05 计算)。
【检验结果的解释】
1.测定标本OD值≥临界值时为抗体阳性。测定标本OD值<临界值时为抗体阴性。
2.阳性对照OD值不低于1.0且阴性对照OD值不高于0.1时的实验结果有效。否则需重新试验。
【检验方法的局限性】该试验方法仅适用于定性检测和辅助诊断。
【产品性能指标】应使用企业参考品进行检测，其中阴性参考品血清、阳性参考品血清应符合阴阳性参考品血清要求，最低检出限应符合最低检出限血清的检出要求，精密度CV（%）不高于15%，37℃放置6天产品性能稳定。
百日咳疫苗免疫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）【注意事项】
1.检测标本尽量避免反复冻融、溶血或长菌，否则可能影响检测结果。
2.不同批号、不同品种试剂不能混用；封板膜不能重复使用。
3.各种试剂使用前要混匀；部分溶液（如洗液等）如有结晶析出，轻微加热或摇匀溶解后不影响使用。
4.请严格按说明书操作，严格控制反应时间和反应温度，各种反应液均需用加液器加注，并经常校对其准确性。
5.反应板开封后不能一次用完时，将剩余板条和干燥剂同时放入塑料袋内封好，置2－8℃可短期保存。
6.所有标本、废液、阳性对照等均按传染性污染物处理（试剂盒内的对照血清已进行灭活处理），121℃高压蒸汽灭菌30分钟或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。