许多生长因子已被提纯和确定了其结构组成。如血小板来源的生长因子(PDGF)是个热稳定、具较高正电荷的蛋白质,人肝细胞生长因子由含有二硫键的二聚体组成,分子量30000道尔顿左右。又如表皮生长因子(EGF)是个热稳定、含有53个氨基酸残基的多肽,分子量为6000道尔顿左右。各类生长因子都有其相应的受体,是普遍存在于细胞膜上的跨膜蛋白,不少受体具有激酶活性,特别是酪氨酸激酶活性(如PDGF受体、 EGF受体等)。
生长因子有多种,如血小板类生长因子(血小板来源生长因子,PDGF;骨肉瘤来源生长因子ODGF)、表皮生长因子类(表皮生长因子,EGF、转化生长因子,TGFα和TGFβ)、成纤维细胞生长因子(αFGF、βFGF)、类胰岛素生长因子(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)、神经生长因子(NGF)、白细胞介素类生长因子(IL-1、IL-1、IL-3等)、红细胞生长素(EPO)、集落刺激因子(CSF)等。
由于生长因子是由正常细胞分泌,人肝细胞生长因子既无药物类毒性,也无免疫反应,因此在研究其生理作用机制同时,有的已试用于临床治疗。如白细胞介素-2已用于治疗癌症,对肾癌、黑色素瘤效果明显;也用于免疫调节剂和自家免疫有关的疾病。白细胞介素-3用于治疗骨髓功能衰竭与血小板缺失等适应症。表皮生长因子用于人烧伤、创伤、糖尿病皮肤溃疡、褥疮、静脉曲张性皮肤溃疡和角膜损伤,可促进伤口愈合。
准备试剂与收集血样
收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。
标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成16000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。
10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。
洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)
人肝细胞生长因子检测程序
加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。洗板:同前。每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。洗板:同前。每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。每孔加入100ul终止液混匀。30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
注意事项;以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。本试剂盒宜置4oC冰箱保存。本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
化学试剂的保存方法
化学试剂的保存方法
化学试剂的保存方法
ELISA试剂盒检测的成份
相关产品
炭疽热毒素受体2(ANTXR2)酶联免疫分析试剂盒
碳分解代谢物阻遏4样蛋白(CCRN4L)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅲ(CA3)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅳ(CA4)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶ⅤB(CA5B)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅵ(CA6)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)酶联免疫分析试剂盒
碳酸酐酶Ⅻ(CA12)酶联免疫分析试剂盒
羰基还原酶1(CBR1)酶联免疫分析试剂盒
羰基还原酶3(CBR3)酶联免疫分析试剂盒
羰基还原酶4(CBR4)酶联免疫分析试剂盒
糖蛋白Ⅴ(GP5)酶联免疫分析试剂盒
糖蛋白A33(GPA33)酶联免疫分析试剂盒
关注
拨打电话
留言咨询