猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA试剂盒说明书

2015-05-22 16:44  下载量:1

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标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤 1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2孔、阳性对照 2孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀, 3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 3 0分钟。 4.配液:将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此重复 5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同 3。 8.洗涤:操作同 5。 9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀, 37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零, 450nm波长依序测量各孔的吸光度( OD值)。测定应在加终止液后 15分钟以内进行

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