小鼠IL-10 免疫组化试剂盒

2017-01-03 09:49  下载量:0

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小鼠IL-10 免疫组化试剂盒 该试剂盒以HRP标记的链霉亲和素复合物(HRP Streptavidin Conjugate,HRP-SA)为基础,可用于检测细胞、组织内的特异性IL-10抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的IL-10一抗与相应靶抗原结合后,用生物化二抗与一抗特异性结合,最后加入HRP-SA,形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA复合物,显微镜下观察成像。 注意事项: 1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。 2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。 3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。 4. 封片前一定要换用TBS充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会影响结果观察。 5. 如须复染细胞核,则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。 附1: 抗原修复方法 常用抗原修复液:柠檬酸缓冲液(0.01M pH6.0)、EDTA抗原修复液(pH8.0或9.0)等等。 一、酶消化修复法 切片脱蜡水化处理,TBS冲洗,在组织上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS冲洗即可。 二、微波抗原修复法 微波盒中加入抗原修复液微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档或高档继续微波10~15min,取出微波盒冷却至室温后,自来水冲洗,取出切片。因不同微波炉微波处理时间存在差异,须自行调整。 三、直接高压抗原修复法 取修复液于不锈钢高压锅中加热至沸腾,将组织切片置于耐高温切片架上,修复液沸腾后放入切片架,盖上锅盖,待喷气后计时1.5~2.5min即可脱离热源,自然冷却至室温后自来水冲洗,取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。 四、隔水式高压抗原修复法 不锈钢高压锅中加自来水加热至沸腾,微波盒中加入修复液于微波炉中加热至沸腾,将切片放入微波盒中,再将微波盒放入高压锅中盖上锅盖,待喷气后计时4~8 min即可关闭热源,自然冷却至室温后自来水冲洗,取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。

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