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人丙二醛(MDA)Elisa试剂盒的评价分两个方面:一是试剂本身的质量评价,符合一定要求后才能生产供应;一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA诊断试剂为例,首先必须通过中国药品生物制品检定,以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明书等外,对试剂的性能,如特异性、灵敏度、精密度和线性等均需逐项检定,通过对一系列参比品的检测,结果符合要求者才为合格。ELISA试剂的临床质量评价是用该试剂对临床样本进行检测,以观察其实际应用价值。部临检中心对乙肝ELISA诊断试剂在这方面进行了工作,通过质量评价,促进了试剂质量的提高。
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人丙二醛(MDA)Elisa试剂盒诊断试剂临床质量评价要点
从临床应用角度考核检验试剂的可靠性,是以其能否区分健康与疾病的能力作为依据的。目前还很难找到100%可靠的试验,任何试验都会出现假阳性或假阴性。判断试验的可靠性常以其灵敏度及特异性作为考核标准。临床应用的灵敏度用疾病患者试验阳性的百分率表示,特异性以无病者试验阴性的百分率表示。进行这种评价,首先需要收集有关的病人血清,然后用公认的检测该项标志物最可靠的试剂进行测定,以确定其为阳性或阴性。
人丙二醛(MDA)Elisa试剂盒的基本原理是:
①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③测定时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或抗体)按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例;再加入酶反应底物后,底物被酶催化后变为有色产物,根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。
人丙二醛(MDA)Elisa试剂盒实验目的
1.深入了解ELISA 法测定抗体效价的原理。
2.掌握ELISA 法测定单克隆抗体效价的方法。
二、实验原理
ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上,形成酶标抗体/酶标抗原,称为酶结合物。该酶结合物的酶在免疫反应后,作用于底物使之呈色,根据颜色的有无和深浅,定位或定量抗原/抗体。ELISA 法是免疫酶技术的一种,其特点是利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原/抗体,使之固相化,免疫反应和酶促反应都在其中进行。在每次反应后都要反复洗涤,这既保证了反应的定量关系,也避免了末反应的游离抗体/抗原的分离步骤。在ELISA 法中.酶促反应只进行一次,而抗原、抗体的免疫反应可进行一次或数次,即可用二抗(抗抗体)、三抗再次进行免疫反应。
目前常用的几种ELISA 方法有:测定抗体的间接法,测定抗原的双抗体夹心法和测定抗原的竞争法等。本实验采用间接法测定单克隆抗体效价。其主要过程为:首先将已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反应板的凹孔内,加待测抗体,保温后洗涤以除去未结合的杂蛋白质,加酶标抗抗体,保温后洗涤,加底物保温30分钟后,加酸或碱终止酶促反应,用目测或光电比色测定抗体含量。
外源性物质常常是由于用于ELISA测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。
(1)标本溶血 由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中,会导致非特异性显色,干扰测定结果。为克服上述干扰作用,标本采集时必须注意避免溶血。
(2)标本受细菌污染 因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。
(3)标本保存不当 在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性;标本放置时间过长(如一天以上),有时抗原或抗体免疫活性减弱,亦可出现假阴性。为克服上述干扰,ELISA测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
(4)标本凝集不全 在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下,正常血液采集后1/2~2h开始凝固,18~24h完全凝固。临床检验工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;这类情况于次日复查时因血凝已完全,血清中不再有纤维蛋白原存在,故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用,解决的办法最好是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
E-10352 Human type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit 人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10353 Human fibronection related antigen,FRA ELISA Kit 人纤维连接素相关抗原(FRA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10354 Human gastrin cell antibody,GCA ELISA Kit 人胃泌素细胞抗体(GCA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10355 Human Glutamate dehydrogenase;GDH/GLDH ELISA Kit 人谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10356 Human heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA Kit 人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10357 Human Cholic acid,CA ELISA Kit 人胆酸(CA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10358 Human Helicobacter pylori IgG ,Hp-IgG ELISA Kit 人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10359 Human gamma glutamyl transpeptidase,GGT ELISA Kit 人γ谷氨酰转移酶(GGT) Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10360 Human Gastric Mucin,GM ELISA Kit 人胃粘液素(GM)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10361 Human Hya]uronate binding protein,HABP ELISA Kit 人透明质酸结合蛋白(HABP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10362 Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit 人Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10363 Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA Kit 人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10364 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit 人细胞毒素相关蛋白A(CagA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10365 Human gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISA Kit 人胃抑素(GIP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10366 Human gastrin-reliasing peptide,GRP ELISA Kit 人胃泌素释放多肽(GRP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10367 Human pro-gastrin-releasing peptide, ProGRP ELISA Kit 人胃泌素释放肽前体(ProGRP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10368 Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ,HCBⅡ ELISA Kit 人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10369 Human Secretin ELISA Kit 人促胰液素/胰泌素(Secretin)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10370 Human Peptide YY ELISA Kit 人多肽YY(Peptide-YY)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10371 Human gastrin receptor,GsaR ELISA Kit 人促胃液素受体(GsaR)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10372 Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10373 Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)Elisa ELISA. 96T/48T
E-10374 Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10375 Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 人内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10376 Human malondialchehyche,MDA ELISA Kit 人丙二醛(MDA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10377 Human Amylin ELISA Kit 人胰淀素(Amylin)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10378 Human Motilin,MTL ELISA Kit 人胃动素(MTL)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10379 Human cholecystokinin,CCK ELISA Kit 人胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10380 Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit 人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10381 Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit 人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10382 Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10383 Human procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit 人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10384 Human Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 人透明质酸(HA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10385 Human Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA KIT 人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10386 Human Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA KIT 人Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10387 Human Laminin,LN ELISA KIT 人层连蛋白/板层素(LN)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10388 Human Fibronectin,FN ELISA Kit 人纤连蛋白(FN)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10389 Human Fibronectin,FN ELISA Kit 人纤连蛋白(FN)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10390 Human anti-Nogo-A antibody,NOGO-A Ab ELISA Kit 人NOGO-A抗体(Nogo-A Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10391 Human Anti-tissue transglutaminase IgA,tTG-IgA ELISA kit 人抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10392 Human anti-Survivin antibody,Surv ELISA Kit 人抗存活素抗体/生存蛋白(Surv)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10393 Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody,GM-CSF Ab ELISA Kit 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10394 Human Anti-titin Antibody,TTN ELISA Kit 人抗肌联蛋白抗体(TTN)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10395 Human anti-presynaptic membrane antibody,PsmAb ELISA Kit 人抗突触前膜抗体(PsmAb)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10396 Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 antibody,AT2R-Ab ELISA Kit 人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10397 Human angiotension Ⅱ receptor 1 Antibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit 人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10398 Human angiotension I receptor Antibody,ANG-ⅠR antibody ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10399 Human ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit 人卵清蛋白特异性IgG(OVA-sIgG)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10400 Human anti-calmodulin specific antibody,CaM-ab ELISA Kit 人抗钙调素特异抗体(CAM-ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10401 Human thyroid hormone autoantibodies,THAA ELISA Kit 人甲状腺非肽激素抗体(THAA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10402 Human steroid producing cell autoantibody,SCA ELISA Kit 人抗类固醇生成细胞抗体(SCA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10403 Human granulocyte specific antinuclear antibody,GS-ANA ELISA Kit 人粒细胞特异性抗核抗体(GS-ANA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10404 Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit 人抗信号识别颗粒抗体(SRP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10405 Human Blocking antibody,BA ELISA Kit 人封闭抗体(BA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10406 Human anti-cell membrane DNA antibody,cmDNA ELISA Kit 人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10407 Human autoantibodies against the C-terminal domain Ⅳ,ACAST-DⅣ ELISA Kit 人抗钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)Elisa it ELISA. 96T/48T
E-10408 Human ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit 人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10409 Human anti-fibrillarin antibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10410 Human systemic lupus erythematosus,SLE ELISA Kit 人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10411 Human anti-ganglioside antibody,GM1 ELISA Kit 人抗神经节苷脂抗体(GM1)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10412 Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10413 Human anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA Kit 人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10414 Human anti-neutrophil antibody,ANA ELISA Kit 人抗中性粒细胞抗体(ANA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10415 Human anti-apolipoprotein A1 antibody,Apo A1 ELISA Kit 人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10416 Human anti-insulin receptor antibody,AIRA ELISA Kit 人抗胰岛素受体抗体(AIRA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10417 Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA Kit 人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10418 Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA Kit 人抗网硬蛋白抗体(ARA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10419 Human anti-Reticulin antibody,ARA ELISA Kit 人抗网硬蛋白抗体(ARA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10420 Human anti-mutated citrullinated vimentin antibody,MCV ELISA Kit 人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10421 Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit 人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10422 Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit 人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10423 Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit 人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10424 Human anti-parotid duct antibody ELISA Kit 人抗腮腺管抗体(anti-parotid duct Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10425 Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit 人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10426 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit 人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10427 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit 人抗染色体抗体(anti-chromosome Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10428 Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit 人抗脑组织抗体(ABAb)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10429 Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10430 Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit 人抗磷脂酰丝氨酸抗体(APSA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10431 Human anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit 人抗磷壁酸抗体(TA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10432 Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA Kit 人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10433 Human anti-macrophage antibody ELISA Kit 人抗巨噬细胞抗体(anti-macrophage Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10434 Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10435 Human anti-red cell antibody ELISA Kit 人抗红细胞抗体(RBC)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10436 Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA Kit 人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10437 Human anti-nucleolus antibody,ANA ELISA Kit 人抗核仁抗体(ANA)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10438 Human Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10439 Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA Kit 人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10440 Human alveoli basement membrane zone antibody,ABM-Ab ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
E-10441 Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit 人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)Elisa试剂盒 ELISA. 96T/48T
(5)标本管中添加物质的影响 抗凝剂(如肝素,EDTA)、酶抑制剂(如NaN3可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性)及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干扰作用。 综上所述,对临床检验人丙二醛(MDA)Elisa试剂盒测定中出现的假阳性或假阴性结果,在考虑试剂因素和操作因素之外,更多的应从标本因素方面进行分析,并应采取相应措施排除干扰作用,从而为临床提供正确可靠的检测结果。