供货周期: | 现货 |
品牌: | 雅吉生物 |
规格: | 96T/48T |
货号: | E-30570 |
CAS号: | Elisa Kit |
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产品名称:大鼠血管生成素1(ANG-1)Elisa Kit.
规 格:96T/48T
检测标本:血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等
检测方法:ELISA
检测类型:酶联免疫夹心法
运输保存:2~8°保存6个月
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大鼠血管生成素1(ANG-1)Elisa Kit,抗血清的制备方法:
有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。
作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应适龄,健壮,无感染性疾患,最好为///雄性,此外还需十分注意动物的饲养,以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔,最好用纯种新西兰兔,一组三只,兔的体重以2~3kg为宜。
免疫途径
免疫途径有多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等,一般常用皮下或背部多点皮内注射,每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物学活性抗原,一般不宜采用静脉注射。
免疫方法
抗原剂量,首次剂量为300~500μg,加强免疫的剂量约为首次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂,首次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。
在第2次加强免疫后2周,从耳缘静脉取2~3ml血,制备血清,检测抗体效价。如未达到预期效价,需再进行加强免疫,直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时,即可放血制备抗血清。
大鼠血管生成素1(ANG-1)Elisa Kit,包被条件与封闭:
包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2h被认为具有同等的包被效果。包被的最适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/mL-20ug/mL。
封闭(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。抗原或抗体包被时所用的浓度较低,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥在ELISA其后的步骤中干扰物质的再吸附。封闭的手续与包被相类似。最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,其最大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。
封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。
大鼠血管生成素1(ANG-1)Elisa Kit,其他部分相关Elisa Kit:
大鼠血管生成素1(ANG-1)Elisa KitRat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit
大鼠血管生长素(ANG)Elisa KitRat Angiogenin,ANG ELISA Kit
大鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)Elisa KitRat keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit
大鼠环磷酸腺苷(cAMP)Elisa KitRat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)Elisa KitRat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit
大鼠白介素9(IL-9)Elisa KitRat Interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)Elisa KitRat Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit
大鼠转化生长因子α(TGF-α)Elisa KitRat transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit
大鼠孕激素/孕酮(PROG)Elisa KitRat Progesterone,PROG ELISA kit
大鼠雌激素(E)Elisa KitRat estrogen,E ELISA Kit
大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)Elisa KitRat Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA kit
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa KitRat Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit
大鼠脂联素(ADP)Elisa KitRat adiponectin,ADP ELISA Kit
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