方案摘要
方案下载应用领域 | 生物产业 |
检测样本 | |
检测项目 | |
参考标准 | 18ng/L - 650 ng/L 使用 |
间接凝集试验是用人工方法将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联与免 疫无关的颗粒上使之成为致敏颗粒。再与相应抗体(或抗原)作用,在适当 电解质存在条件下出现特异性凝集现象。间接凝集试验又称被动凝集试验。 反应中的载体颗粒增大了可溶性抗原(或抗体)的反应面积,出现肉眼可见 的凝集现象。因此,敏感性要比直接凝集反应高 2~8 倍。该反应广泛用于 各种可溶性抗原(或抗体)的检测。 一、间接凝集试验 间接凝集试验必须使用载体,常用的载体有红细胞(人 O 型红细胞、绵 羊红细胞)和聚苯乙烯胶泵颗粒,其次还可用白陶土、离子交换树脂、明胶 颗粒、活性炭等。新鲜红细胞吸附多糖类抗原较好,溺吸附蛋白质抗原或 抗体较差,通常致敏后的红细胞脆性增加,因此常在致敏前将红细胞醛化, 经醛靴的红细胞不易溶血,易保存。常用的醛化剂有甲醛、戊二醛和丙酮 醛等。醛化红细胞再用鞣酸处理阿增强吸附蛋白质的能力,从而提高试验 的敏感性。致敏所用的抗原(或抗体)要求纯度高。聚苯乙烯颗粒先活化(制 备成带化学活性基团的颗粒,如羧化胶乳颗粒)再与抗原或抗体圈淳晰键交 联在胶乳表面,此种致敏乳胶颗粒具有性能稳定、保存时间长的优点。根 据致敏的抗原或抗体类型分为四类,方法简便、快速、灵敏、特异。 1.正向间接凝集试验 2.反向间接凝集试验 指抗体致敏载体检测标本中相应的抗原。 3.间接凝集抑制试验 以抗原致敏载体及相应抗体为诊断试剂,检测标本中是否存在与致敏 抗原相同的抗原。若用抗体致敏载体颗粒及相应的抗原作为诊断试剂,检 测标本中的抗体,称为反向间接凝集抑制试验。 4.协同凝集试验 与间接凝集试验的原理相似。但采用金黄色葡萄球菌(SPA)为载体,该 菌体的细胞壁中含有 A 蛋白(SPA),SPA 具有能与特异性 IgG 的 Fc 段结合的 特性。 二、间接血凝试验 以红细胞作为载体,用已知的抗原或抗体致敏红细胞,在适宜条件下与标 本中的相应抗体(或抗原)结合,出现红细胞凝集者为阳性,根据凝集的程 度判断阳性反应的强弱。是目前广泛应用的经典抗原抗体反应之一。 三、乳胶凝集试验 聚苯乙烯乳胶微粒作为载体的凝集试验。由于乳胶的多特性多用途已 发展成一套免疫乳胶技术,如微板凝集、导管凝集和膜过滤斑点试验等。 乳胶为人工合成载体,性能比生物来源红细胞稳定,均一性好。但乳胶与 蛋白质结合能力及凝集性能不如红细胞,因此敏感性不及血凝试验。 四、间接凝集试验的临床应用 (1)抗微生物抗体的检测:如沙门菌抗体、乙型肝炎抗体、血吸虫抗体。 (2)自身抗体的检测(抗核抗体、类风湿因子、抗甲状腺球蛋白抗体)。 (3)变态反应患者抗体。 (4)抗原的检测:反向间接凝集试验检测 AFP、HbsAg、乳胶凝集试验检 测 HCG 等。
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