ELISA试剂盒操作出现的问题与解决方案

小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒说明书

简介：小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒说明书 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中前列腺素E2 （PGE2）的含量。 ELISA 实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠前列腺素E2（PGE2）水平。用纯化的小鼠前列腺素E2（PGE2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入前列腺素E2（PGE2），再与HRP 标记的前列腺素E2（PGE2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的前列腺素E2（PGE2）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠前列腺素E2（PGE2）浓度。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 计算：以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

黑色素染色液(硫酸亚铁法)染色说明书

简介：黑色素染色液(硫酸亚铁法)染色说明书 产品简介： 黑色素属于非血源性内栻色素，是一组颜色从浅棕色到黑色的色素。这种色素通常出现在皮肤、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。黑色素有一个显著的物理性质，即完全不溶解于大多数有机溶剂——几乎可以肯定是由于黑素体中已形成的黑色素可与蛋白质紧密结合。黑色素另一个物理性质是能够被强氧化剂漂白，尽管这个过程是缓慢的。在病理情况下，这种色素也可出现在良性痣细胞瘤中和恶性黑色素瘤中。许多方法可用于识别黑色素和黑色素栻成细胞，其中最可靠的有：还原方法，如Masson-Fontana 银技术和Schmorl 三价铁-铁氰化钾还原实验；酶方法(如多巴反应)；荧光方法；免疫组织化学。 黑色素染色液(硫酸亚铁法)利用银氨溶液的还原形成金属银的反应即嗜银反应原理来显示黑色素。硫酸亚铁法现在已广泛用于常规目的，是利用黑色素的嗜银特性。酸性硝酸银溶液可使黑色素变黑。黑色素具有嗜银性，这意味着镀银染色法(使用外部还原剂)可以把黑色素染成黑色。硫酸亚铁法又称为亚铁离子摄取法，本染色液适用于石蜡切片，固定采用福尔马林较好，不宜采用铬酸盐固定液。 产品组成： 试剂(A): 硫酸亚铁溶液 100ml RT 试剂(B): 酸性铁氰化钾溶液 100ml RT 避光 试剂(C): 核固红染色液 100ml RT 避光 自备材料： 1、10%福尔马林固定液 2、蒸馏水 操作步骤(仅供参考)： 1、固定：福尔马林是最好的固定液。 2、将实验切片及对照切片入蒸馏水清洗。 3、入硫酸亚铁溶液浸染1h。 4、蒸馏水洗5～6 次。 5、入酸性铁氰化钾溶液浸染30min。 6、蒸馏水洗3～4 次。 7、入核固红染色液，复染核2～5min。 8、蒸馏水冲洗2 次。 9、脱水、透明、合成树脂封固。 实验结果： 皮肤、眼睛、Pina 和神经黑素中的黑色素 深绿色 胞核 红色 注意事项： 1、该染色方法是黑色素特有的，具有很好的鉴别诊断作用。 2、应当避免使用铬酸盐和氧化汞等固定液。 3、此方法不能使三价铁和脂褐素染色。 4、核固红复染时，应根据具体切片摸索染色时间。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 6 个月有效。

小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒下载说明书

简介：小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒下载说明书 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)含量。 实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)水平。用纯化的小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入糖缺失性转铁蛋白(CDT)，再与HRP 标记的糖缺失性转铁蛋白(CDT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的糖缺失性转铁蛋白(CDT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)浓度。 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 ELISA 试剂盒组成： 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片（48） 2 片（96） 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：9000pg/ml 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶2-8℃保存 试剂盒性能： 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.95 以上。 2.批内与批见应分别小于9%和11% 检测范围： 500 pg/mL -12000 pg/mL 保存条件及有效期： 1.试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月

人脑钠素(BNP)ELISA试剂盒说明书下载

简介：人脑钠素(BNP)ELISA试剂盒说明书下载 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中脑钠素（BNP）的含量。 ELISA 实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脑钠素（BNP）水平。用纯化的人脑钠素（BNP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脑钠素（BNP），再与HRP标记的脑钠素（BNP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脑钠素（BNP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人脑钠素（BNP）浓度。 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 ELISA 试剂盒组成： 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片（48） 2 片（96） 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：9000pg/ml 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶2-8℃保存

兔白细胞介素6(IL-6)试剂盒说明书下载

简介：兔白细胞介素6(IL-6)试剂盒说明书下载 兔白细胞介素6(IL-6)试剂盒目的：试剂盒用于测定兔血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素6（IL-6）的含量。 兔白细胞介素6(IL-6)试剂盒实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔白细胞介素6（IL-6）水平。用纯化的兔白细胞介素6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素6（IL-6），再与HRP 标记的白细胞介素6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6（IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中兔白细胞介素6（IL-6）浓度。 ELISA 试剂盒组成： 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片（48） 2 片（96） 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：135ng/L 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶2-8℃保存 试剂盒性能： 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.95 以上。 2.批内与批间应分别小于9%和11% 检测范围： 5ng/L -100ng/L 保存条件及有效期： 1.试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。