人I型胶原(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒实验方法

2015-01-23 11:32  下载量:0

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注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 产品货号:SBJ-H0204 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本人I 型胶原(Col-Ⅰ)的含量。 ELISA 实验原理:试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人I 型胶原(Col-Ⅰ)水平。用纯化的人I 型胶原(Col-Ⅰ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入I 型胶原(Col-Ⅰ),再与HRP 标记的I 型胶原(Col-Ⅰ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的I 型胶原(Col-Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人I 型胶原(Col-Ⅰ)浓度。

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