免疫组化染色试剂盒标本染色步骤

南京森贝伽生物科技有限公司

2014/09/12 18:41

试剂盒内容
试剂（无色液体）： 3%H2O2去离子水 3ml、6ml或18ml
试剂A（蓝色液体）：封闭用正常山羊血清工作液 3ml、6ml或18ml
试剂B（黄色液体）：生物素化二抗工作液（IgG/Bio） 3ml、6ml或18ml
试剂C（橙色液体）：辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP) 3ml、6ml或18ml
标本染色
1、石蜡切片，常规脱蜡至水。
2、蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。
3、3%H2O2去离子水（无色液体）孵育15-20分钟，以消除内源性过氧化物酶活性。
4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20分钟，倾去，勿洗
5、滴加适当比例稀释的一抗，37 oC孵育2-3小时或4oC过夜
6、PBS冲洗，3分钟×3次
7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37 oC孵育15-20分钟
8、PBS冲洗，3分钟×3次
9、滴加试剂C（橙色液体），室温或37 oC 孵育15-20分钟
10、PBS冲洗，3分钟×3次
11、显色剂显色（DAB或AEC）
12、自来水充分冲洗
13、如果需要，可进行复染，脱水，透明
14、选择适当的封片剂封片。

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