试剂盒内容
试剂 (无色液体): 3%H2O2去离子水 3ml、6ml或18ml
试剂A(蓝色液体):封闭用正常山羊血清工作液 3ml、6ml或18ml
试剂B(黄色液体):生物素化二抗工作液(IgG/Bio) 3ml、6ml或18ml
试剂C(橙色液体):辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP) 3ml、6ml或18ml
标本染色
1、石蜡切片,常规脱蜡至水。
2、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%H2O2去离子水(无色液体)孵育15-20分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20分钟,倾去,勿洗
5、滴加适当比例稀释的一抗,37 oC孵育2-3小时或4oC过夜
6、PBS冲洗,3分钟×3次
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37 oC孵育15-20分钟
8、PBS冲洗,3分钟×3次
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37 oC 孵育15-20分钟
10、PBS冲洗,3分钟×3次
11、显色剂显色(DAB或AEC)
12、自来水充分冲洗
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明
14、选择适当的封片剂封片。
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