碱性磷酸酶染色液(改良Gomori 钙钴法)如何操作
首先(一)石蜡切片染色
1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、 切片入ALP 孵育液中,37℃孵育2~12h。
3、流水洗2min,入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液中,37℃孵育5min。
5、流水洗5min 后,入蒸馏水。
6、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育2min。
7、流水洗10min,入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。
9、石蜡切片常规脱水、透明,树胶封片。
然后(二)冰冻切片染色
1、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内,4℃固定2~5min。
2、切片入ALP 孵育液,37℃孵育5~15min。
3、流水洗2min,入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液,37℃孵育5min。
5、流水洗5min 后,入蒸馏水。
6、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50 倍, 即
为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入ALP 硫化工作液,孵育1~2min。
7、流水洗10min,入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。
9、栺油明胶封片。
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