碱性磷酸酶染色液(改良Gomori 钙钴法)操作步骤

2014/10/20   下载量: 0

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碱性磷酸酶染色液(改良Gomori 钙钴法)操作步骤 自备材料: 1、 蒸馏水 2、 温箱或水浴锅 操作步骤(仅供参考): (一)石蜡切片染色 1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 2、 切片入ALP 孵育液中,37℃孵育2~12h。 3、流水洗2min,入蒸馏水。 4、入硝酸钴溶液中,37℃孵育5min。 5、流水洗5min 后,入蒸馏水。 6、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育2min。 7、流水洗10min,入蒸馏水。 8、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。 9、石蜡切片常规脱水、透明,树胶封片。 (二)冰冻切片染色 1、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内,4℃固定2~5min。 2、切片入ALP 孵育液,37℃孵育5~15min。 3、流水洗2min,入蒸馏水。 4、入硝酸钴溶液,37℃孵育5min。 5、流水洗5min 后,入蒸馏水。 6、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入ALP 硫化工作液,孵育1~2min。 7、流水洗10min,入蒸馏水。 8、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。 9、栺油明胶封片。

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