酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法)染色步骤

2014/11/03   下载量: 0

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酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法)染色步骤 首先自备材料: 1、蒸馏水 2、恒温箱 3、封片剂 操作步骤(仅供参考): (一)冰冻切片染色 1、冰冻切片至蒸馏水。 2、切片入ACP 孵育液,置于37℃温箱,浸染15~60min。 3、入37℃蒸馏水中洗2 次,每次1min,以去除未被吸附的铅。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育1~2min。 5、流水冲洗3~5min,蒸馏水洗。 6、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。 7、栺油明胶封片。 (二)石蜡切片染色 1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 2、切片入ACP 孵育液,置于37℃温箱,浸染4~12h,可以延长至24h。 3、入37℃蒸馏水中洗2 次,每次1min,以去除未被吸附的铅。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育1~2min。 5、流水冲洗3~5min,蒸馏水洗。 6、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。 7、石蜡切片脱水,常规透明,中性树胶封片。 阴性对照(可选):将切片置入试剂(C)--ACP 对照液中,室温1~2h 孵育,其余步骤相同,结果为阴性。

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