方案摘要
方案下载| 应用领域 | 生物产业 |
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Western Blotting 操作步骤 一、Western Blotting 实验步骤概述1、 组织取材：组织块称重 2、利用液氮、研钵粉碎组织块 3、加入RIPA缓冲液（每克组织3ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分*1分钟）维持4℃ 4、加入PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30分钟 5、移入离心管4℃，约20,000g（约15,000转）15分钟 6、上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存 7、进行Bradford比色法测定蛋白质浓度 8、取相同质量的细胞裂解液（体积*蛋白质浓度），并加等体积的2×电泳加样缓冲液 9、沸水浴中3分钟 10上样 11、电泳（浓缩胶20mA，分离胶35mA） 12、电转膜仪转膜（100mA 40分钟） 13、膜用丽春红染色，胶用考马斯亮蓝染色 14、Westernblot 试剂盒显色 15、分析比较记录
文献贡献者
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