eBioscience磷酸化抗体破膜缓冲液选择指南

eBioscience磷酸化抗体都经过三种buffer(IC fixation and permeabilization, Foxp3/Transcription Factor Buffer, and IC fixation Buffer/Methanol的测试,在抗体说明书上详细告知了最适buffer的种类。由于甲醇会毁坏某些抗体识别的表位,理想的状况是在甲醇作用前做表面marker的标记,这些marker的抗体可以选择甲醇耐受的荧光标记,如eFluor450、FITC或eFluor660。

然而另一方面,表面抗体与细胞的结合可能也会引起不必要的激活。

所以,我们推荐在刺激/处理、固定及甲醇处理之后来做表面抗体的标记,不受固定过程影响的抗体克隆号选择,可参考前面的文章“固定破膜对细胞表面抗体的影响”,来源:http://us.ebioscience.com/resources/application/flow-cytometry/clone-performance-after-fix-perm.htm

 Target  Clone IC fix/perm  Foxp3  IC fix/methanol  pSTAT1 (Y701)  KIKSI0803 -  -  +++  pSTAT4 (Y693)  4LURPIE -  -  +++  pSTAT5 (Y694)  SRBCZX -  -  +++  pSTAT6 (Y641)  CHI2S4N -  -  +++  pSrc (Y418)  SC1T2M3  ++  ++  +++  pZAP-70/SYK Y319/Y352  n3kobu5  ++  ++  +++  pSYK (Y348)  moch1ct  ++  ++  +++  pBTK/ITK (Y551/Y511)  M4G3LN  ++  ++  +++  pERK1/2 (T202/Y204)  MILAN8R -   -  +++  pNFkB p65 (S529)  B33B4WP  +++   -  +++  pS6 (Y235/Y236)  cupk43k  +++   ++  +++  pH2AX (S139)  CR55T33 -   +++  +++

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厂商 目录号 产品名称(简述) 规格 eBioscience 85-00-8222-49 IC Fixation Buffer 125 mL 125 mL eBioscience 85-88-8824-00 Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set Kit Kit eBioscience 85-00-5523-00 Foxp3 / Transcription Factor Staining Buffer Set Kit Kit




 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015010020.html

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