转化的非洲绿猴肾细胞，COS7 SV40细胞

转化的非洲绿猴肾细胞，COS7 SV40细胞 COS7 SV40 贴壁成纤维细胞

（1）细胞背景

此细胞株源自CV-1细胞株，经转染起始点缺失的SV40病毒突变体得到；编码表达野生型T抗原，所以该细胞适合作为需要SV40 T抗原表达的载体的转染宿主。该细胞表达T抗原，允许SV40病毒的溶解性生长，支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制，支持起始区域缺陷的SV40突变体的复制。因含有SV40病毒的DNA序列，该细胞需要在2级生物安全柜中操作。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 猴

（4）培养条件

1）培养基：RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）转化的非洲绿猴肾细胞，COS7 SV40细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到转化的非洲绿猴肾细胞，COS7 SV40细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82186 Hot Taq DNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： Hot Taq DNA Polymerase ，级别： 层析纯，200NADu/mg，液体 ，规格： 25毫克

A82187 Hotstart Taq DNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： Hotstart Taq DNA Polymerase ，级别： 高层析纯，360NADu/mg，液体 ，规格： 25毫克

A82188 Taq plus DNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： Taq plus DNA Polymerase ，级别： BR,500-800u/mg,酵母,液体 ，规格： 25毫升

A82189 Pfu DNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： Pfu DNA Polymerase ，级别： BR,200u/mg,兔肌,芬末 ，规格： 100毫升

A82190 SP6核糖核酸聚合酶 ，英文名或英文缩写： SP6 RNA Polymerase ，级别： BR,150u/mg，芬末，微生物 ，规格： 500毫升

A82191 T3 RNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： T3 RNA Polymerase ，级别： BR，100-300u/mg，液体，兔肌 ，规格： 25克

A82192 T7 RNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： T7 RNA Polymerase ，级别： BR，2万u/g ，规格： 100克

A82193 T4 DNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： T4 DNA Polymerase ，级别： BR，3000u/g ，规格： 1公斤

A82194 T7 DNA聚合酶 ，英文名或英文缩写： T7 DNA Polymerase ，级别： BR，破壁率90% ，规格： 5克

A82195 T4 RNA连接酶 ，英文名或英文缩写： T4 RNA Ligase ，级别： BR ，规格： 25克

A82196 T4 DNA连接酶 ，英文名或英文缩写： T4 DNA Ligase ，级别： 层析纯，30u/mg ，规格： 100克

A82197 末端脱氧核苷酸转移酶 ，英文名或英文缩写： TDT ，级别： PCR级，600u/ml ，规格： 25克

A82198 RAPD引物 ，英文名或英文缩写： RAPD Primer ，级别： 超纯，75% ，规格： 100克

A82199 随机引物 ，英文名或英文缩写： Random primers ，级别： BR，40u/ul ，规格： 500克

A82200 葡聚糖酶 ，英文名或英文缩写： β-Dextranase ，级别： BR,4000BAEEu/mg,大豆 ，规格： 1克

A82201 5′-核苷酸磷酸解酶 ，英文名或英文缩写： 5′-NT ，级别： BR,1000BAEEu/mg,橹豆 ，规格： 5克

A82202 5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄苷酸环己氨盐 ，英文名或英文缩写： X-GlcA ，级别： 高纯，6000U/mg；80% ，规格： 25克

A82203 5-溴-4氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： BCIG ，级别： BR，100U/mg ，规格： 100克

A82204 5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： X-GalNAc ，级别： BR，10u/ul ，规格： 1克

A82205 5-溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： Magenta-gal ，级别： BR，200u/ul ，规格： 5克

A82206 4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： PNPG ，级别： BR，200u/ul ，规格： 25克

A82207 4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： PNPG ，级别： 共轭级,4500u/mg,小牛肠，甘油溶液 ，规格： 100克

A82208 4-硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： PNPG ，级别： 共轭级,4500u/mg ，规格： 1克

A82209 4-硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： PNPG ，级别： BR,1u/ul，小牛肠，液体 ，规格： 5克

A82210 4-硝基苯-β-D-吡喃葡糖醛酸苷 ，英文名或英文缩写： PNPG ，级别： 精制级,10u/mg大肠杆菌,液体 ，规格： 25克

A82211 2-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： ONPG ，级别： 层析纯,30u/mg，大肠杆菌,液体 ，规格： 100克

A82212 2-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： ONPG ，级别： 共轭级,4500u/mg,小牛肠,芬末 ，规格： 1克

A82213 2-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： ONPG ，级别： BR，～1U/mg ，规格： 5克

A82214 2-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： ONPG ，级别： 生物技术级，35u/mg ，规格： 25克

A82215 正-辛基谷氨酸 ，英文名或英文缩写： OGP ，级别： 精制级，15000-50000u/g ，规格： 100克

A82216 4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： PNP-Nag ，级别： 超纯，80% ，规格： 1公斤

A82217 4-硝基苯-N-乙酰-α-D-氨基葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： GlcNAc1-α-PNP ，级别： BR，90% ，规格： 50克

A82218 4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： GalNAc1-β-PNP ，级别： BR，98% ，规格： 250克

A82219 复合酶稳定剂AES ，英文名或英文缩写： Enzyme Stabilizer AES ，级别： BR，98% ，规格： 1公斤

A82220 肽链端解酶 ，英文名或英文缩写： Peptidase ，级别： BR，92%，三水物 ，规格： 25克

A82221 风味蛋白酶 ，英文名或英文缩写： Flavourzyme ，级别： BR，80u/mg ，规格： 100克

A82222 碱性蛋白酶 ，英文名或英文缩写： Alkaline proteinase ，级别： BR，90%，自由酸 ，规格： 1公斤

A82223 复合酶 ，英文名或英文缩写： Compound proteinase ，级别： BR，97%，二钠 ，规格： 100克

A82224 谷氨酰铵转氨酶 ，英文名或英文缩写： TG ，级别： 试剂级，97%，二钠，三水物 ，规格： 100克

A82225 碳酸脱水酶(牛红血球) ，英文名或英文缩写： Carbonic anhydrase(Bovine erythrocytes) ，级别： BR，98% ，规格： 100克

A82226 羧肽酶A（牛胰） ，英文名或英文缩写： Carboxypeptidase A ，级别： 高纯，95% ，规格： 100克

A82227 精蛋白酶 ，英文名或英文缩写： Carboxypeptidase B ，级别： BR，99% ，规格： 100克

A82228 羧肽酶Y（酵母） ，英文名或英文缩写： Carboxypeptidase Y(Yeast) ，级别： 细胞培养级，85% ，规格： 100克

A82229 丁酰胆碱酯酶 ，英文名或英文缩写： BUCHE ，级别： BR，2u/ul ，规格： 100克

A82230 乙酰胆碱酯酶 ，英文名或英文缩写： ACHE ，级别： 生物技术级，200 u/mg,芬末 ，规格： 100克

A82231 糜蛋白酶原 ，英文名或英文缩写： Chymotrypsinogen A ，转化的非洲绿猴肾细胞，COS7 SV40细胞级别： BR，10u/ul,液体 ，规格： 100克

A82232 降纤酶 ，英文名或英文缩写： Defibrase ，级别： BR，60000U/mg ，规格： 100克

A82233 弹性硬朊酶 ，英文名或英文缩写： Elastase ，级别： BR，400u/mg ，规格： 5克

A82234 半乳糖氧化酶 ，英文名或英文缩写： Galactose oxidase ，级别： 精制级，1000-3000u/mg ，规格： 25克

A82235 3-磷酸甘油脱氢酶 ，英文名或英文缩写： α-Glycerophosphate dehydrogenase ，级别： BR，300u/mg，芬末 ，规格： 1克

A82236 苹果酸脱氢酶 ，英文名或英文缩写： MDH ，级别： BR，300u/mg，液体 ，规格： 5克

A82237 肌激酶 ，英文名或英文缩写： Myokinase ，级别： BR，10% ，规格： 5克