小鼠脂肪细胞，3T3 L1细胞

小鼠脂肪细胞，3T3 L1细胞 3T3 L1 贴壁成纤维细胞

（1）细胞背景

3T3 L1是通过克隆分离得到的3T3 (swiss小白鼠)的连续亚株。 当细胞从快速分裂到长满且接触抑制时，该细胞经过前脂肪向脂肪样逆转。 培液中，高血清含量可以促进脂肪积累.

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 小鼠

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）小鼠脂肪细胞，3T3 L1细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到小鼠脂肪细胞，3T3 L1细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82327 甘精胰岛素 ，英文名或英文缩写： Insulin Human recombinant ，级别： BR，3-20u/mg，液体 ，规格： 100毫克

A82328 玻璃酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium hyaluronate ，级别： BR，0.5-3u/mg，芬末 ，规格： 500u

A82329 SDS-PAGE超低分子量标准品 ，英文名或英文缩写： Super low range protein MW marker ，级别： BR ，规格： 2500u

A82330 4.1-66kDa低范围分子量MARK ，英文名或英文缩写： Low range protein MW marker ，级别： 层析纯，35u/mg ，规格： 250毫克

A82331 小分子MARK ，英文名或英文缩写： Protein little MW marker ，级别： BR，5u/mg ，规格： 1克

A82332 低分子MARK ，英文名或英文缩写： SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins ，级别： BR，2u/mg ，规格： 25克

A82333 14.4-116kDa分子量MARK ，英文名或英文缩写： 14.4-116kDa Protein Molecular weight Mark ，级别： 生物技术级,150u/mg ，规格： 100克

A82334 19-119kDa预先染色分子量MARK ，英文名或英文缩写： Prestained Protein Molecular weight Mark ，级别： BR，250u/mg ，规格： 500克

A82335 15-150kDa精确分子量MARK ，英文名或英文缩写： Precise Protein Molecular weight Mark ，级别： BR, 500000u/mg ，规格： 1公斤

A82336 次高分子MARK ，英文名或英文缩写： SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins ，级别： BR，3500u/mg ，规格： 25克

A82337 中分子量标准蛋白 ，英文名或英文缩写： Middle range protein MW marker ，级别： BR，100u/mg ，规格： 100克

A82338 高分子量标准蛋白 ，英文名或英文缩写： High range protein MW marker ，级别： BR，10u/mg ，规格： 1公斤

A82339 低范围RNA Ladder ，英文名或英文缩写： RiboRuler Low range RNA Ladder ，级别： BR ，规格： 25克

A82340 高范围RNA Ladder ，英文名或英文缩写： RiboRuler High range RNA Ladder ，级别： BR,0.4u/mg，小麦，芬末 ，规格： 100克

A82341 植物血凝素 ，英文名或英文缩写： PHA ，级别： BR,0.5-3u/mg,马铃薯,芬末 ，规格： 1公斤

A82342 植物血球凝集素PHA-P ，英文名或英文缩写： PHA-P ，级别： BR,10u/mg，甘薯，液体 ，规格： 25克

A82343 细胞血素C ，英文名或英文缩写： Cytochrome C ，级别： BR，0.5u/mg ，规格： 100克

A82344 组蛋白A（小牛胸腺） ，英文名或英文缩写： Histones,dried(Calf thymus) ，级别： 重组体 ，规格： 500克

A82345 组蛋白 ，英文名或英文缩写： Histone ，级别： BR，15-25u/mg，芬末 ，规格： 100克

A82346 核酸组蛋白（小牛胸腺） ，英文名或英文缩写： Histones nucleo from calf thymus ，级别： BR，10-40u/mg，液体 ，规格： 500克

A82347 组蛋白H1（小牛胸腺） ，英文名或英文缩写： Histones H1 from calf thymus ，级别： BR，0.01-0.04u/mg ，规格： 25克

A82348 粘蛋白 ，英文名或英文缩写： Mucin ，级别： BR，200u/g ，规格： 100克

A82349 粘液素II ，英文名或英文缩写： Mucin ，级别： BR，200u/mg ，规格： 1公斤

A82350 蛋白保护剂TY ，英文名或英文缩写： Protein protectant TY ，级别： 生物技术级，200u/mg ，规格： 1克

A82351 琼脂糖蛋白A ，英文名或英文缩写： Protein A–Agarose ，级别： 重组体，100u/mg，液体 ，规格： 5克

A82352 金属硫蛋白 ，英文名或英文缩写： MT ，级别： BR，1u/mg,液体 ，规格： 25克

A82353 肌球素 ，英文名或英文缩写： Myoglobin from equine skeletal muscle ，级别： BR，2-6u/mg ，规格： 25克

A82354 琼脂糖凝胶4B蛋白A ，英文名或英文缩写： Protein A-Sepharose 4B, Fast Flow from Staphylococcus aureus ，级别： BR，97%，腐蚀品 ，规格： 100克

A82355 纤连蛋白(人血) ，英文名或英文缩写： CIG ，级别： 超纯，98% ，规格： 500克

A82356 β-乳球蛋白 ，英文名或英文缩写： β-Lactoglobulin ，级别： USP级，96%，225IU/mg ，规格： 50克

A82357 Olig(dT)15 ，英文名或英文缩写： Olig(dT)15 ，级别： 高纯，98% ，规格： 250克

A82358 PUC18质粒 ，英文名或英文缩写： PUC18质粒 ，级别： BR，50u/mg ，规格： 5克

A82359 PUC19质粒 ，英文名或英文缩写： PUC19质粒 ，级别： 超纯，98% ，规格： 25克

A82360 结合珠蛋白 ，英文名或英文缩写： Haptoglobin from pooled human plasma ，级别： 高纯，50u/mg ，规格： 100克

A82361 蛋白脱脂剂 ，英文名或英文缩写： Lipids-Remover from proteins ，级别： BR，40% ，规格： 1克

A82362 氧合血红蛋白 ，英文名或英文缩写： Oxyhemoglobin ，级别： BR，98% ，规格： 1克

A82363 蛋白稳定化试剂 ，英文名或英文缩写： Prionex ，级别： BR，5u/mg ，规格： 5克

A82364 泛素 ，英文名或英文缩写： Ub ，小鼠脂肪细胞，3T3 L1细胞级别： BR ，规格： 25克

A82365 乳白蛋白 ，英文名或英文缩写： α-Lactalbumin ，级别： BR，50u/mg ，规格： 1克

A82366 利发霉素 ，英文名或英文缩写： Rifampicin ，级别： BR，20u/mg ，规格： 5克

A82367 艾狄密新 ，英文名或英文缩写： Erythromycin ，级别： BR，10u/mg ，规格： 5克

A82368 杆菌肽锌 ，英文名或英文缩写： Bacitracin zinc ，级别： BR，200u/mg，响尾蛇毒液 ，规格： 25克

A82369 枯草菌肽 ，英文名或英文缩写： Bacitracin ，级别： BR，600-2400u/mg，蜜蜂毒液 ，规格： 100克

A82370 松胞菌素B ，英文名或英文缩写： Cytochalasin B ，级别： BR，600u/mg，猪胰 ，规格： 1公斤