人胚肺成纤维细胞，HELF细胞

人胚肺成纤维细胞，HELF细胞 HELF 贴壁成纤维细胞

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人胚肺成纤维细胞，HELF细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人胚肺成纤维细胞，HELF细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82736 藻朊钠 ，英文名或英文缩写： Sodium alginate ，级别： 超纯，99% ，规格： 5克

A82737 藻朊酸 ，英文名或英文缩写： Alginic acid ，级别： 超纯，99% ，规格： 250毫克

A82738 β-D-呋喃果糖基- α-D-吡喃葡萄苷 ，英文名或英文缩写： Sucrose ，级别： 高纯，98% ，规格： 250毫克

A82739 清凉茶糖 ，英文名或英文缩写： L-Sorbose ，级别： 高纯，98% ，规格： 1克

A82740 D-山梨糖醇 ，英文名或英文缩写： D-Sorbitol ，级别： 高纯，98% ，规格： 10毫克

A82741 海带多糖 ，英文名或英文缩写： Laminarin from Laminaria digitata ，级别： 高纯，98% ，规格： 100U

A82742 脂多糖 ，英文名或英文缩写： LPS ，级别： 高纯，98% ，规格： 500U

A82743 饴糖 ，英文名或英文缩写： Maltose ，级别： 高纯，98% ，规格： 100U

A82744 D-(+)-麦芽糖单水合物 ，英文名或英文缩写： Maltose monohydrate ，级别： 超纯，99% ，规格： 0.1UN

A82745 半木质 ，英文名或英文缩写： Xylan ，级别： 超纯，98% ，规格： 0.25UN

A82746 壳聚糖 ，英文名或英文缩写： Chitosan ，级别： 高纯 ，98% ，规格： 1UN

A82747 水溶性壳聚糖 ，英文名或英文缩写： Chitosan ，级别： 高纯 ，98% ，规格： 25毫克

A82748 几丁质 ，英文名或英文缩写： Chitin ，级别： 高纯，97% ，规格： 100毫克

A82749 2,4-己二烯酸 ，英文名或英文缩写： Sorbic acid ，级别： 高纯，98% ，规格： 500毫克

A82750 棉子糖 ，英文名或英文缩写： D-(+)-Raffinose pentahydrate ，级别： BR，90% ，规格： 1克

A82751 D-脆核糖 ，英文名或英文缩写： D-Ribose ，级别： BR，15～20A260单位/mg ，规格： 1毫克

A82752 2-脱氧-D-赤戊糖 ，英文名或英文缩写： 2-Deoxy-D-Ribose ，级别： BR，90% ，规格： 500U

A82753 2-去氧-D-葡萄糖 ，英文名或英文缩写： 2-Deoxy-D-glucose ，级别： BR，85% ，规格： 100毫克

A82754 D-吡喃甘露糖 ，英文名或英文缩写： D-Mannose ，级别： BR，50mg/ml ，规格： 250毫克

A82755 甘露醇 ，英文名或英文缩写： D-Mannitol ，级别： BR，85% ，规格： 1毫克

A82756 6-脱氧-L-甘露糖 ，英文名或英文缩写： L(+)-Rhamnose monohydrate ，级别： 高纯，90% ，规格： 5毫克

A82757 环己六醇 ，英文名或英文缩写： Inositol ，级别： BR，90% ，规格： 5毫克

A82758 L-2-羟基丙酸 ，英文名或英文缩写： L-(+)-Lactic acid ，级别： BR，20mg/ml ，规格： 250毫克

A82759 乳酸 ，英文名或英文缩写： DL-Lactic acid ，级别： 生物技术级，5mg/ml ，规格： 1克

A82760 L-羟基琥珀酸 ，英文名或英文缩写： L-Malic acid ，级别： CP，99% ，规格： 100毫克

A82761 苹果酸 ，英文名或英文缩写： DL-Malic acid ，级别： CP，99% ，规格： 1毫克

A82762 1,4-二硫苏糖醇 ，英文名或英文缩写： DTT ，级别： CP，98% ，规格： 250U

A82763 二硫代赤藓糖醇 ，英文名或英文缩写： DTE ，级别： 试剂级，98% ，规格： 1KU

A82764 粘胶质 ，英文名或英文缩写： Pectin ，级别： 试剂级，98% ，规格： 5克

A82765 多聚果胶酸钠 ，英文名或英文缩写： Polygalacturonic acid sodium salt ，级别： BR，99% ，规格： 25克

A82766 果胶酸 ，英文名或英文缩写： Polygalacturonic acid ，级别： 高纯，99% ，规格： 200U

A82767 异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 ，英文名或英文缩写： IPTG ，级别： BR，98% ，规格： 800U

A82768 甲基-α-D-吡喃甘露糖苷 ，英文名或英文缩写： Methyl α-D-mannopyranoside ，级别： 高纯，96% ，规格： 100U

A82769 4-甲基伞花基-β-D-葡糖苷酸 ，英文名或英文缩写： MUG ，级别： 高纯，98% ，规格： 10U

A82770 4-甲基-7-(磷酰氧基)-2H-1-苯并呋喃-2-酮二钠盐 ，英文名或英文缩写： 4-MUP ，级别： 植物细胞培养级，98% ，规格： 1毫克

A82771 N-癸酰基-N-甲基葡糖铵 ，英文名或英文缩写： MEGA-10 ，级别： 优质级 ，规格： 1毫克

A82772 N-癸基-β-D-吡喃葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： Decyl-β-D-glucopyranoside ，级别： 优质级 ，规格： 1毫克

A82773 N-壬酰基-N-甲基葡萄糖铵 ，英文名或英文缩写： MEGA-9 ，级别： 优质级 ，规格： 600U

A82774 N-辛酰基-N-甲基葡糖铵 ，英文名或英文缩写： OMEGA ，级别： 优质级 ，规格： 3KU

A82775 甲泛影酰铵 ，英文名或英文缩写： Metrizamide ，级别： 优质级 ，规格： 1毫克

A82776 葡甲铵 ，英文名或英文缩写： Meglumine ，级别： 高纯，98% ，规格： 5毫克

A82777 2-羟基丙酸锌 ，英文名或英文缩写： Zinc lactate ，人胚肺成纤维细胞，HELF细胞级别： 高纯，98% ，规格： 100毫克

A82778 乳酸低铁 ，英文名或英文缩写： Ferrous lactate ，级别： BR，90% ，规格： 500毫克

A82779 L-乳酸钙 ，英文名或英文缩写： Calcium Lactate ，级别： BR，98% ，规格： 150U

A82780 乳酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium lactate ，级别： 高纯，98% ，规格： 100U

A82781 2-羟基丙酸单钠盐 ，英文名或英文缩写： Sodium DL-lactate ，级别： CP，98% ，规格： 500U

A82782 枸橼酸钙 ，英文名或英文缩写： Calcium citrate tetrahydrate ，级别： CP ，规格： 5毫克