人乳腺癌细胞，SK-BR-3细胞

人乳腺癌细胞，SK-BR-3细胞 SK-BR-3 贴壁上皮细胞

（1）细胞背景

这株细胞是1970年由Trempe G和Old LJ从一位43岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离得到的。该细胞亚显微结构特征包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝；过表达HER2/c-erb-2基因产物。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人乳腺癌细胞，SK-BR-3细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人乳腺癌细胞，SK-BR-3细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A87537 顺式-9-十八烯醇 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87538 苯酞 ，规格： 500克 ，保存条件： RT，避光

A87539 反式芪 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A87540 水合萜品 ，规格： 500克 ，保存条件： RT

A87541 二硫化苄 ，规格： 10克 ，保存条件： RT，避光

A87542 茴香脑 ，规格： 100克 ，保存条件： RT，避光

A87543 福氏完全佐剂 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT，避光

A87544 福氏不完全佐剂 ，规格： 250克 ，保存条件： RT

A87545 4-（2-氨乙基）苯磺酰氯 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A87546 三氯乙氧基甲酰氯 ，规格： 100克 ，保存条件： RT，避光

A87547 一步法总RNA提取试剂 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87548 DNAzol提取试剂 ，规格： 100克 ，保存条件： RT，避光

A87549 N-R添加剂 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87550 B-27添加剂 ，规格： 500克 ，保存条件： RT，避光

A87551 章鱼碱 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87552 Olig(Dt)15 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87553 对称二苯基偶氮羰酰肼 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A87554 双硫腙 ，规格： 500克 ，保存条件： RT，避光

A87555 HAT混合盐 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A87556 HT混合盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A87557 胆酸（牛） ，规格： 500克 ，保存条件： RT，避光

A87558 石胆酸 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A87559 脱氧胆酸 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A87560 异去氧胆酸 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A87561 去氢胆酸 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A87562 DL-α-硫辛酸 ，规格： 10克 ，保存条件： RT

A87563 2，4-二硝基苯肼 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87564 5-溴尿嘧啶 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A87565 α-硫辛酸 ，规格： 10克 ，保存条件： RT

A87566 6-氮杂尿嘧啶 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87567 8-羟基喹哪啶 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87568 羊毛脂 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A87569 脑磷脂 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87570 硅藻土 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87571 硅藻土载体 ，规格： 1克 ，保存条件： 2～8℃

A87572 硅藻土滤盒 ，规格： 5克 ，保存条件： 2～8℃

A87573 硅藻土G ，规格： 25克 ，保存条件： 2～8℃

A87574 5-氯代水杨酸 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87575 丙烯酸甲酯 ，规格： 5克 ，保存条件： RT，避光

A87576 丙二酸二乙酯 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87577 丙烯酸 ，规格： 5克 ，保存条件： RT，避光

A87578 甲基丙烯酸甲酯 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87579 邻甲苯铵 ，规格： 25毫克 ，保存条件： RT，避光

A87580 无水乙腈 ，规格： 5克 ，保存条件： RT，避光

A87581 间羟基苯甲酸 ，规格： 10克 ，保存条件： RT，避光

A87582 ω-溴苯乙酮 ，规格： 5克 ，保存条件： RT，避光

A87583 七氧化四铽 ，规格： 25克 ，保存条件： RT，避光

A87584 2，4-二硝基苯甲酸 ，规格： 25克 ，人乳腺癌细胞，SK-BR-3细胞保存条件： RT，避光

A87585 乙酸铈 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A87586 对甲苯磺酸 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A87587 4-溴苯甲酸 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A87588 苯甲酰肼 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A87589 2-氨基联苯 ，规格： 1克 ，保存条件： RT，避光