人食管癌细胞，TE-13细胞

人食管癌细胞，TE-13细胞 TE-13 贴壁上皮细胞

（1）细胞背景

用于食管癌的相关研究。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人食管癌细胞，TE-13细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人食管癌细胞，TE-13细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

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