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反相色谱柱
反相色谱法(RPC)于20世纪70年代中期问世,现已成为工业、学术及政府实验室分析小分子量化合物的标准方法。
现在,RPC更成为了制药业、化学工业及生物化学工业分离肽、蛋白质及其它生物大分子的公认方法。
与正相色谱法相反,RPC需要非极性固定相与极性流动相。流动相通常由水(缓冲液)与乙腈、甲醇、THF或2-丙醇混合构成。
硅胶颗粒是最为常用的基质,其与十八烷基硅烷(ODS)起衍生反应。聚合物基质已经成为硅胶基质的替代物,特别是在分析中性或碱性化合物的过程中,具有良好的表现。
RPC柱可用于分析多种化合物,包括中极性、无极性、酸性、碱性、两性化合物等。RPC也是分析衍生氨基酸、肽和蛋白质的一种方法,但是蛋白质淋洗需要高浓度的有机溶剂,因此会破坏蛋白质结构。
东曹生命科学可以提供16种以硅胶或甲基丙烯酸树脂颗粒(如下所述)为基质的反相柱。
甲基丙烯酸酯基质TSKgel反相柱由孔径尺寸及粒度范围不同的聚甲基丙烯酸酯聚合物构成。聚甲基丙烯酸酯颗粒的优点包括:
亲水性的骨架减少了二次作用,提高了回收率
在pH=1~12之间稳定性好
与有机溶剂相溶,可消除溶胀
作为大MW生物分子(>10,000 Da)和高pH值条件下分析小MW化合物的良好选择,TSKgel聚合物基质反相柱有4个系列的产品:
Octadecyl-2PW (12.5 nm)
Octadecyl-4PW (5 nm)
Phenyl-5PW RP (100 nm)
Octadecyl-NPR (无孔)
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