Toyopearl复合模式填料产品资讯

羟基磷灰石Ca10(PO4)6(OH)2被加工成高纯度球状颗粒,可作为层析填料使用。由于其结晶的化学结构、立体构造的特点,羟基磷灰石与抗体的Fab片段、Fc片段可发生相互作用。所以至今为止,羟基磷灰石在抗体及蛋白质的纯化、多聚体和残留核酸的去除等工艺中,作为精细纯化步骤的填料被广泛使用。最近,由于其特殊的相互作用(金属螯合、氢键等作用),羟基磷灰石作为阳离子交换型的混合模式填料,被人们重新认识。

羟基磷灰石由于在酸性溶液中化学稳定性相对较差,所以使用条件上存在一定的限制。


● 羟基磷灰石的主要用途

· 分离抗体及蛋白质的多聚体、异构体、分解物以及电荷异质体目标产品内源性杂质

· 分离DNA、HCP、病毒等来自生产工艺混入的外源性杂质/污染物

· 适用于最终(精纯)步骤中的分离纯化


● 在酸性条件下,与市售羟基磷灰石耐久性对比

在高吸附(高载量;下同)型羟基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型(B公司、Type I)和高耐久型(B公司、Type II;载量较低)羟基磷灰石填料装填的层析柱中,连续用弱酸性蒸馏水通液时,层析柱的理论塔板数的变化如上图所示。市售品在大约80~90小时通液后,理论塔板数下降10%以上。与之相比,Ca++Pure-HA的理论塔板数虽然也会缓慢减少,但在约160小时之前,理论塔板数仍保持在90%以上。也就是说,Ca++Pure-HA属于高吸附型,且在酸性条件下的耐久性更好。另外,在更低的酸性条件(pH 6.5~3.5)下使用和需要酸洗时,可以推荐使用耐盐性阳离子交换填料TOYOPEARL Sulfate-650F阳离子交换型的混合模式填料TOYOPEARL MX-Trp-650M


● 羟基磷灰石和混合模式填料(包括耐盐性离子交换填料)的性能比较

分离模式

TOYOPEARL

羟基磷灰石

耐盐性阴离子交换填料

耐盐性阳离子交换填料

混合模式

产品名称

NH2-750F

Sulfate-650F

MX-Trp-650M

Ca++Pure-HA

填料基质

亲水性聚合物

羟基磷灰石

粒径

45 μm

45 μm

75 μm

39 μm

官能团、配基

多胺基

硫酸基

色氨酸

Ca2+, PO43-, OH-

官能团、配基密度

0.07~0.13 eq/L

≥0.53 eq/L

-

-

静态吸附

(SBC:人IgG)

≥70 g/L

≥114 g/L

≥75 g/L

≥20 g/L* (55 g/L)

出厂溶剂

20%乙醇**

20%乙醇、

0.2 mol/L醋酸钠

20%乙醇

干燥凝胶

(或1 mol/L的NaOH溶液)

保存温度

室温

特点

· 即使在盐浓度较高条件下,也具有较高载量

· 有较大的细孔径,去除
多聚体、病毒、DNA、内毒素的效果更好

· 流穿效果好

· 多聚体分离效果更好

· 即使在盐浓度较高条件下,也具有较高载量

· 也可用于肝素类亲和分离

· 高吸附量,分离峰形
尖锐,回收率高

· 即使在盐浓度较高条
件下,也具有较高载量

· 二价特异性抗体、
scFv的分离效果好

· 具有与市售品同等或更高的吸附

· 填料耐久性也更高

· 具有与市售品同等或更高的性能,但价格更便宜

(注意)

洗脱液使用磷酸钙、氯化钾

* 动态吸附量(DBC):驻留时间是2分钟;驻留时间5分钟时,DBC是55 g/L-gel。

** TOYOPEARL NH2-750F需要使用0.1 mol/L HCl清洗,置换对离子后,才能保存在20%乙醇水溶液中。


● 羟基磷灰石和混合模式填料(包括耐盐性离子交换填料)的产品一览

货号

产品名称

粒径

(μm)

包装规格*

备注

0045045

Ca++Pure-HA

39

50 g

散装填料(瓶)

0045053

Robocolumn Ca++Pure-HA, 8 × 200 μL

39

200 μL × 8

96微孔板专用

0045054

Robocolumn Ca++Pure-HA, 8 × 600 μL

39

600 μL × 8

96微孔板专用

0023439

TOYOPEARL NH2-750F

45

250 mL

散装填料(瓶)

0023443

ToyoScreen NH2-750F

45

1 mL × 6

预装柱,需要使用ToyoScreen Holder(柱套)

0023444

ToyoScreen NH2-750F

45

5 mL × 6

预装柱,需要使用ToyoScreen Holder(柱套)

0045021

RoboColumn NH2-750F

45

200 μL × 8

96微孔板专用

0045022

RoboColumn NH2-750F

45

600 μL × 8

96微孔板专用

0023468

TOYOPEARL Sulfate-650F

45

250 mL

散装填料(瓶)

0023472

ToyoScreen Sulfate-650F

45

1 mL × 6

预装柱,需要使用ToyoScreen Holder(柱套)

0023473

ToyoScreen Sulfate-650F

45

5 mL × 6

预装柱,需要使用ToyoScreen Holder(柱套)

0045027

RoboColumn Sulfate-650F

45

200 μL × 8

96微孔板专用

0045028

RoboColumn Sulfate-650F

45

600 μL × 8

96微孔板专用

0022817

TOYOPEARL MX-Trp-650M

75

25 mL

散装填料(瓶)

0022824

ToyoScreen MX-Trp-650M

75

1 mL × 6

预装柱,需要使用ToyoScreen Holder(柱套)

0022825

ToyoScreen MX-Trp-650M

75

5 mL × 6

预装柱,需要使用ToyoScreen Holder(柱套)

0045051

RoboColumn MX-Trp-650M

75

200 μL × 8

96微孔板专用

0045052

RoboColumn MX-Trp-650M

75

600 μL × 8

96微孔板专用

0021400

ToyoScreen Holder

-

-

柱套、转接头(入口1 mL专用)、(入口5 mL专用)、转接头(出口)各1个、堵头2个

* Ca++Pure-HA是干燥粉末品。可提供不同体积包装的产品。 ToyoScreen预装柱可以直接连接HPLC系统。

Ca++Pure-HA是美国制造的产品,受美国相关出口法令的限制。


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