培养基热点问题第二弹来咯
“码好这一篇,培养不用愁”
问题1
1%的TTC溶液是否可以添加到PCA琼脂培养基中,以便于菌落计数?
答:大部分细菌含有脱氢酶,能使相应的底物脱氢,TTC作为氢的受体,还原后产生红色,使菌落呈红色,易于辨别。
TTC是一种化学试剂,也是一种抑菌剂,但当其浓度<0.2%时,从理论上来说,对大部分细菌无抑制作用,但对某些敏感的细菌仍然有一定的抑菌效果(未做验证),不建议添加。
如由于计数困难确实需要,可将1%TTC溶液1ml添加到1000ml PCA琼脂中,但可能对菌落总数有一定的影响。
问题2
平板在冰箱储存一段时间后有水渗出,是否影响使用?
答:平板在贮存过程中会发生水分蒸发,若一次性平板处于未拆封的状态,可按其保存条件在有效期内储存、使用。由于冰箱有冻干的作用,已拆封的产品不宜长时间储存,当培养基中的水分损失超过15%时,微生物就很难在其上面生长。
问题3
在样品定量检测中,双料培养基和单料培养基有什么区别?
答:双料培养基是在同等体积的条件下,加入双倍的培养基成分。在样品定量检测中(MPN法),如培养基体积为9ml时,当样品接种量为1ml时,可用单料培养基;当接种量大于1ml时,必需用双料培养基,以确保提供足够的生长条件。
问题4
食品微生物检测中,无菌水、生理盐水、磷酸盐缓冲液三者之间的区别?
答:无菌水就是简单的检测水进行灭菌;生理盐水是0.85%的NaCl水溶液;磷酸盐缓冲液一般是选择磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按照一定比例配制的缓冲液。
在食品微生物检测中,三者最主要的区别在于对菌的保护作用:1)无菌水不存在对菌的保护,因为渗透压的作用,还可能造成菌吸水胀裂死亡;2)生理盐水的渗透压基本与菌的细胞液相当,会对菌有一定的保护;3)磷酸盐缓冲液除了在渗透压方面对菌有保护作用,对pH也有一定的缓冲作用,因此对菌有更好的保护。
磷酸盐缓冲液
国标要求,微生物检测需要用生理盐水或磷酸盐缓冲液稀释。但也有部分研究表明,检测样品若NaCl含量超过10%也可以使用无菌水稀释,但并未被国家标准认可。
问题5
一次性平板培养基保存过程中出现冷凝水过多的现象是什么原因造成?
答:一次性平板培养基在成型后会形成网格结构,将水分子锁定在网格中。当温差变化过大时,网格中的水分子会因为网格结构缩小而渗出,形成冷凝水。
因此,在一次性平板培养基的保存过程中,应严格按贮存温度进行保存,并尽量避免过大的温差变化,使用前可将平板置洁净的流通空气或在干燥箱(50℃,10min)中短时间干燥。
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