在微生物检测过程中,要保证检测环境及所用工具的洁净度,确保无菌性,同时要防止人为操作失误,在适宜温度下进行培养,这样才能为合理决策和指导生产提供依据。
为保证微生物检测结果的准确性,逗点生物为您提供以下几个方面的小tips:
壹
培养基的灭菌和使用
☛ 每次配制时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。
☛ 培养基配制时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。
☛ 一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。
☛ 灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效的灭菌时间。
☛ 灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过3天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。
☛ 在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水浴温度待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。
☛ 做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 48℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,使化好的培养基结块凝固。
☛ 每瓶培养基均要做空白。
☛ 尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。
贰
工具的洁净度
☛ 玻璃器皿要采用干热灭菌方式进行灭菌。
☛ 检测用剪刀、勺子等物品要做到检测专用,不可与其它操作器具混用,使用时,先用75%酒精消毒,再采用灼烧方式进行灭菌。
☛ 接种环(针)采用灼烧方式灭菌,但要注意检测时要先将其进行冷却。
叁
样品的采集及检测
保证采样工具的无菌性
☛ 玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,容易导致玻璃器皿易裂纹而报废)。
☛ 取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。
☛ 取样勺:要保证其清洁消毒,清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。
☛ 取样袋:可先用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。
☛ 电子称表面用75%酒精消毒。
带铁丝
带侧边滤膜
带压条
立式带压
不带压条平口
人员操作
☛ 保证手部的清洗、消毒:取样前及检测前都要先洗手再消毒。
☛ 取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。
☛ 取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。
☛ 往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。
☛ 样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉),进行 100 倍稀释时,1mL 吸管要伸入盐水中,不可以将样品从管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。
☛ 盐水温度以 40℃左右为宜,不能过热,会将部分微生物烫死;也不能温度太低,不能将样品溶解完全。
☛ 进行稀释时要摇匀,保证溶液的均一性。
☛ 倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中易干掉,微生物亦死亡,以15mL左右为宜。
☛ 做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。
☛ 接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况,导致无法判断、确认。
☛ 检测完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。
便携式恒温培养箱
肆
微生物的培养
☛ 在培养过程中,要随时监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。
☛ 要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。
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