猪白细胞介素 10(IL-10)elsia试剂盒使用方法

2015-03-18 15:26  下载量:1

资料摘要

资料下载

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于 -20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 3 0分钟。 4.配液:将 20倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此重复 5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同 3。 8.洗涤:操作同 5。 9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀, 37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零, 450nm波长依序测量各孔的吸光度( OD值)。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。操作程序总结以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

资料下载

文献贡献者

相关资料 更多

相关产品

当前位置: fssy 资料 猪白细胞介素 10(IL-10)elsia试剂盒使用方法

关注

拨打电话

留言咨询