大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)试剂盒使用说明书

2015-05-05 16:46  下载量:1

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大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)试剂盒操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 240nmol/L 5 号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 120nmol/L 4 号标准品 150μl的5 号标准品加入150μl标准品稀释液 60nmol/L 3 号标准品 150μl的4 号标准品加入150μl标准品稀释液 30nmol/L 2 号标准品 150μl的3 号标准品加入150μl标准品稀释液 15nmol/L 1 号标准品 150μl的2 号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样50μl, 待测样品孔中先加样品稀释液40μl, 然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止 液后 15分钟以内进行。 大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)试剂盒注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值 大于标准品孔第一孔的OD 值) ,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5) 。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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