RD elisa试剂盒

2015-07-06 13:28  下载量:1

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详细介绍:   RDelisa试剂盒,是美国RD公司的一种品牌。      R&DSystems集近40年经验,研发出一系列优质细胞生物学产品。R&DSystems97%的产品来自于自己强大的研发团队。闻名于业界的严格质控,其产品的高品质保证您轻松无忧,倾情探索生命奥秘,立于科研的前沿!我公司自成立以来,一直代理经销RD品牌elisa检测试剂盒,深受广大师生客户的好评。感谢新老顾客对我司的大力支持,你的满意将是我们最大的动力,我们将继续努力,为RD品牌创立新的销售台阶!      RDelisa试剂盒操作:      原理:采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为FGF6已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井和任何FGF6目前被绑定的固定化抗体。生物素共轭的抗体特异性FGF6除去任何未结合的物质后,加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后,加入到孔中。经过洗涤,以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂,底物溶液加入到孔中,显色成比例的量的初始步骤中的约束的FGF6。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。      试剂盒组成部分: 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(240U/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个      操作步骤: 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 120U/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 60U/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 30U/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 15U/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 7.5U/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。   计算结果:       建议使用专业的软“曲线专家1.3”的标准曲线,这可以从我们的网站下载。      平均每个标准和样品的重复读数和平均减去零标准的光学密度。      标准曲线,通过减少使用能产生四参数逻辑(4-PL)的曲线拟合的计算机软件的数据。作为一种替代方法,建立标准曲线,对在y-轴的浓度通过绘制在x-轴为每个标准的平均吸光度,并绘制一个通过在曲线图上的点的最佳拟合曲线。该数据可以通过绘制的FGF6浓度与日志的OD值和最佳拟合直线的日志,可以通过回归分析确定线性化。此过程会产生足够的,但不太精确的适合的数据。      如果已稀释的样品,从标准曲线上读出的浓度必须乘以稀释因子。

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