体液脯氨酸肽酶克林纳(Chinard)比色法定量检测试剂盒

2015-05-12 13:11  下载量:1

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主要用途 体液脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林纳(Chinard)比色法定量检测试剂是一种旨在通过脯氨酸肽酶反应系统中底物二肽X-Proline水解后释放的脯氨酸,与茚三酮反应后,产生的吸光值变化,即采用比色法来测定体液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种生物性液体样品(羊水、阴道液体、精液、胸腔积液等等)脯氨酸肽酶(PLD)的总活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。 技术背景 蛋白质结构中存在着两种肽键(peptide bond)形式:氢原子肽键和亚氨肽键(imidopeptide bond)。后者为脯氨酸或羟脯氨酸的杂环氮原子(heterocyclic nitrogen atom)肽键。超过25%脯氨酸和羟脯氨酸构成的胶原蛋白(占人体30%蛋白总量)和明胶蛋白的肽键是杂环氮原子肽键。它们是结缔组织的主要构架。脯氨酸肽酶(prolidase;PLD;EC3.4.13.9),又称为氨酰脯氨酸水解酶(aminoacyl-L-proline hydrolase),是一种亚氨二肽酶(imidodipeptidase),催化含有二肽羧基末端(C-terminal)的脯氨酸(proline)或羟脯氨酸(hydroxyproline)的水解反应,通过细胞间的蛋白降解,释放脯氨酸,尤其是胶原蛋白或食源性蛋白的终极降解具有重要作用。脯氨酸肽酶广泛存在于人体组织中,在肾组织、肠粘膜和红细胞中活性较高,而在肝组织、脑组织和血浆中较低。脯氨酸肽酶由2个同源亚单位构成,有493个氨基酸,分子量为110kD。脯氨酸肽酶的活性检测用来评价和诊断脯氨酸肽酶缺陷症(prolidase deficiency;PD)状况。基于二肽底物甘氨酰脯氨酸(Glycyl-L-Proline)在脯氨酸肽酶的催化下,释放出脯氨酸,进而与茚三酮(ninhydrin)反应,呈现粉红色而发生吸光值的增高(515nm波长),来定量测定脯氨酸肽酶的活性。脯氨酸肽酶反应系统为:

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