资料摘要
资料下载标本的采集及保存 1. 血清:全血标本请于室温放置2 小时或4℃过夜后于1000 x g 离心20 分钟,取上清即可 检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2. 血浆:可用EDTA 或肝素作为抗凝剂,标本采集后30 分钟内于2 - 8° C 1000 x g 离心15 分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将标本放 于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 标本的稀释原则: 首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准 曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度 时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2 瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10 分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释200 pg/ml, 100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,3.12 pg/ml,样品稀释液直接作为 标准浓度0 pg/ml,临用前15 分钟内配制。 如配制100 pg/ml 标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)200 pg/ml 的上述标准品加入含0.5ml 样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则: 临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制 (每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl 生物素标记抗体加990μl 生物素标 记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
大鼠甲状腺素(T4)试剂盒详细资料
简介:大鼠甲状腺素(T4)试剂盒实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠甲状腺素(T4)水平。用纯化的大鼠甲状腺素(T4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲状腺素(T4),再与HRP标记的甲状腺素(T4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状腺素(T4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠甲状腺素(T4)浓度。 大鼠甲状腺素(T4)试剂盒操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 240μg/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 120μg/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 60μg/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 30μg/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 15μg/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 大鼠甲状腺素(T4)试剂盒注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
人抗核糖体抗体(ANA) ELISA试剂盒使用方法
简介:使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗核糖体抗体(ANA)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗核糖体抗体(ANA)水平。用纯化的人核糖体抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗核糖体抗体(ANA),再与HRP标记的核糖体抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗核糖体抗体(ANA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗核糖体抗体(ANA)浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
人激肽释放酶1(KLK 1)ELISA试剂盒样本说明
简介:使用目的:人激肽释放酶1(KLK 1)ELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中内皮素 (ET)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素 (ET)水平。用纯化的大鼠内皮素 (ET)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素 (ET),再与HRP标记的内皮素 (ET)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素 (ET)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素 (ET)浓度。 人激肽释放酶1(KLK 1)ELISA试剂盒标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 人激肽释放酶1(KLK 1)ELISA试剂盒注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒操作说明
简介:使用目的:人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中内皮素 (ET)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素 (ET)水平。用纯化的大鼠内皮素 (ET)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素 (ET),再与HRP标记的内皮素 (ET)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素 (ET)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素 (ET)浓度。 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
人类,ADAM15去整合素和金属蛋白酶15 ELISA试剂盒说明书
简介:产品名称:人力去整合素和金属蛋白酶15,ADAM15ELISA试剂盒 别名:RP11-540D14.1,MDC15,解聚素和金属蛋白酶域15|解聚素和金属蛋白酶域15(metargidin)|金属蛋白酶RGD整合素蛋白|金属蛋白酶像,崩解 代码:CSB-E14041h 大小:96T 种类:人的 目标名称:的ADAMmetallopeptidase域15 缩写:ADAM15 蛋白质生物过程:血管生成 样品类型:血清,血浆 检测范围:0.625ng/ml-40毫微克/毫升 灵敏度:0.156毫微克/毫升
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