细菌蛋白质微量提取试剂盒使用步骤

2015-04-21 16:32  下载量:0

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本试剂盒适用于细菌天然 总蛋白的快速微量 提取,可用于各种 后续实验研究。本产品的其主要特点是: 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液或冰冻菌体沉淀。 在 1.5mL 塑料离心管中操作,适用于大规模的快速筛选。 采用温和的中性裂解成分,蛋白保持天然活性。 产率是 5-10 mg 蛋白质/mL 细菌。 无须昂贵设备,无需溶菌 酶、超声波破碎等 复杂的操作步骤,离心分离即可得到,简单便捷。 得到的提取物可以直接用于 SDS-PAGE、2D 电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和 BCA 法和及 Lowry 法蛋白定量(不适用于 Bradford 法)。使用方法 取 1mL 过夜培养的细菌,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃上清,尽量吸 干剩余液体。如为冰冻保存的菌体沉淀可直接进行第 2 步。 每 10mg 湿重菌体沉淀加入 0.5 mL 溶液 A 和 50 uL 溶液 B,吹打混匀。 冰上放置 30 分钟至 1 小时至菌液变清。 4℃ 12,000 g 离心 1 分钟。 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于 -70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行 SDS-PAGE 电泳,可取部分样 品到离心管中,加入 5×SDS-PAGE 上样缓冲液(终浓度为 1×),在 沸水中处理 5 分钟后立即上样电泳。

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