大鼠热休克蛋白-90(HSP-90)酶联免疫分析

2015-05-22 16:35  下载量:0

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标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠重组干扰素a-2b(rIFN-a-2b)水平。用纯 化的小鼠重组干扰素a-2b(rIFN-a-2b)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微 孔中依次加入重组干扰素a-2b(rIFN-a-2b),再与HRP 标记的重组干扰素a-2b(rIFN-a-2b) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 重组干扰素a-2b(rIFN-a-2b)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值), 通过标准曲线计算样品中小鼠重组干扰素a-2b(rIFN-a-2b)浓度。

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